作者IFN113 (CY)
看板Biotech
標題[求救] DNase I 與NGS關係
時間Thu Jun 27 10:27:31 2024
當初抽RNA以及建庫的時候沒有加入DNase I
請問定序出來分析的結果有可信性嗎?或者說能怎麼調整呢.....
當初沒有加是抽RNA KIT的廠商說不用加也沒影響的........
但後來因為RNA QC不佳有多做RNA Clean Up.......
現在不曉得DNA會不會干擾到RNA分析.....謝謝.... TAT
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 39.15.57.61 (臺灣)
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1F:→ Bows: 沒有做O/E的話不太會抽到dna06/27 15:16
※ 編輯: IFN113 (39.15.57.61 臺灣), 06/27/2024 16:21:20
2F:→ blence: 真的嗎? 如果是,一般RT-PCR何必在意primer有無跨intron 06/27 20:11
3F:→ xxtomnyxx: 會不會有DNA污染要看你用的Kit是哪一種;會不會有干擾 06/27 21:33
4F:→ xxtomnyxx: 要看你的 RNA-seq 廠商是怎麼做的 06/27 21:33
5F:→ maurice9325: 應該是有的基因沒有intron,且不是每個probe都跨intr 06/28 09:01
6F:→ maurice9325: on?如果怕自己手殘直接花錢請待抽,才不會想東想西 06/28 09:01
7F:→ maurice9325: ,老闆也少一個藉口。 06/28 09:01
8F:推 tharaohfu: DNA會影響RNA-seq的...先確定sample裡的DNA汙染程度 06/28 23:23
9F:→ tharaohfu: 看個Fragment分析就知道了。也要問一下你的RNA-seq是否 06/28 23:24
10F:→ tharaohfu: 可以排除DNA汙染 很久沒碰了 或許現在新技術可以無視XD 06/28 23:25
11F:推 dubius: 我很想知道o/e是什麼意思 06/30 14:43
12F:→ xxtomnyxx: 通常是指 over expression,丟plasmid進細胞,plasmid 06/30 19:24
13F:→ xxtomnyxx: 在早期copy number會很高而且plasmid的大小讓它很容易 06/30 19:24
14F:→ xxtomnyxx: 混在RNA裡面 06/30 19:24
15F:推 penguinbb: 如果你rna-seq library 有做polyA selection 那應該是 07/01 06:42
16F:→ penguinbb: 不用擔心DNA的問題 07/01 06:42
17F:推 kaoruotsuki: 你的情況通常不用管DNA的問題 07/07 16:49