作者vagus0620 (demian)
看板Biotech
標題[求救] 請問Tris-Glycine與Bis-Tris系統
時間Tue Jul 18 23:44:35 2023
各位先進好
個人之前腦波弱買了廠商建議的預鑄Bis-Tris膠，那時候不知道Bis-Tris系統跟原本的Tr
is-Glycine差很多，所以跑膠是用Bis-Tris跑，transfer還是用原本的Tris-Glycine+20%
Methanol buffer，就這樣也跑了好一陣子…
今天問廠商其它的問題時，她說跑膠跟Transfer的系統要一樣才行…請問假如兩個不一樣
，會造成結果很大的誤差嗎？真的是好擔心之前做的要丟垃圾桶了…
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1F：→ xxtomnyxx: 呃.....你可以問問看廠商跑膠和transfer系統不一樣會 07/19 00:12
2F：→ xxtomnyxx: 有什麼問題。然後你仔細想一想，你總有跑marker吧？pr 07/19 00:12
3F：→ xxtomnyxx: otein也該有定量過吧？然後你western blotting有任何 07/19 00:12
4F：→ xxtomnyxx: 異常嗎？ 07/19 00:12
5F：→ xxtomnyxx: 你如果有搞懂整個SDS-PAGE是怎麼運作的，廠商講錯的時 07/19 00:12
6F：→ xxtomnyxx: 候就不會被唬的一愣一愣的了，而且很多業務其實只管賣 07/19 00:12
7F：→ xxtomnyxx: ，他們自己也許根本也不懂他們的產品是如何運作的。It 07/19 00:12
8F：→ xxtomnyxx: just works! Magic! 07/19 00:12
9F：→ vagus0620: 聽到她這樣說的時候我也是很疑惑，畢竟marker也有過去 07/19 00:32
10F：→ vagus0620: ，actin什麼的也看起來頗正常。但是自從昨天知道marker 07/19 00:32
11F：→ vagus0620: 在兩種buffer中高分子量會跑得不一樣真的很震驚…我用t 07/19 00:32
12F：→ vagus0620: ris-glycine跑非常多年了，說真的她建議我買Bis-Tris 07/19 00:32
13F：→ vagus0620: 膠的時候我真的沒仔細了解它們的差異 07/19 00:32
14F：推 jsi: 參照marker說明書在兩個系統分別標示的對照分子量即可。 07/19 20:25
15F：→ xxtomnyxx: Marker 在不同 PAGE 中是會因為 pH 不同等等因素，跑出 07/19 22:17
16F：→ xxtomnyxx: 不同的樣子，而且 marker 本來就只是"參考"，跑起來不 07/19 22:18
17F：→ xxtomnyxx: 一樣也不會影響結果 07/19 22:18
18F：推 tynse71864: 我同版主這樣做欸 其實轉的過去都還好 07/20 14:09
19F：推 greenmoon00: marker算是相對比較 反正這個高度的就是這個分子量 07/22 12:59
20F：→ greenmoon00: 除非根本跑不開 07/22 12:59