作者vagus0620 (demian)
看板Biotech
标题[求救] 请问Tris-Glycine与Bis-Tris系统
时间Tue Jul 18 23:44:35 2023
各位先进好
个人之前脑波弱买了厂商建议的预铸Bis-Tris胶,那时候不知道Bis-Tris系统跟原本的Tr
is-Glycine差很多,所以跑胶是用Bis-Tris跑,transfer还是用原本的Tris-Glycine+20%
Methanol buffer,就这样也跑了好一阵子…
今天问厂商其它的问题时,她说跑胶跟Transfer的系统要一样才行…请问假如两个不一样
,会造成结果很大的误差吗?真的是好担心之前做的要丢垃圾桶了…
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 220.132.117.37 (台湾)
※ 文章网址: https://webptt.com/cn.aspx?n=bbs/Biotech/M.1689695077.A.12E.html
1F:→ xxtomnyxx: 呃.....你可以问问看厂商跑胶和transfer系统不一样会 07/19 00:12
2F:→ xxtomnyxx: 有什麽问题。然後你仔细想一想,你总有跑marker吧?pr 07/19 00:12
3F:→ xxtomnyxx: otein也该有定量过吧?然後你western blotting有任何 07/19 00:12
4F:→ xxtomnyxx: 异常吗? 07/19 00:12
5F:→ xxtomnyxx: 你如果有搞懂整个SDS-PAGE是怎麽运作的,厂商讲错的时 07/19 00:12
6F:→ xxtomnyxx: 候就不会被唬的一愣一愣的了,而且很多业务其实只管卖 07/19 00:12
7F:→ xxtomnyxx: ,他们自己也许根本也不懂他们的产品是如何运作的。It 07/19 00:12
8F:→ xxtomnyxx: just works! Magic! 07/19 00:12
9F:→ vagus0620: 听到她这样说的时候我也是很疑惑,毕竟marker也有过去 07/19 00:32
10F:→ vagus0620: ,actin什麽的也看起来颇正常。但是自从昨天知道marker 07/19 00:32
11F:→ vagus0620: 在两种buffer中高分子量会跑得不一样真的很震惊…我用t 07/19 00:32
12F:→ vagus0620: ris-glycine跑非常多年了,说真的她建议我买Bis-Tris 07/19 00:32
13F:→ vagus0620: 胶的时候我真的没仔细了解它们的差异 07/19 00:32
14F:推 jsi: 参照marker说明书在两个系统分别标示的对照分子量即可。 07/19 20:25
15F:→ xxtomnyxx: Marker 在不同 PAGE 中是会因为 pH 不同等等因素,跑出 07/19 22:17
16F:→ xxtomnyxx: 不同的样子,而且 marker 本来就只是"参考",跑起来不 07/19 22:18
17F:→ xxtomnyxx: 一样也不会影响结果 07/19 22:18
18F:推 tynse71864: 我同版主这样做欸 其实转的过去都还好 07/20 14:09
19F:推 greenmoon00: marker算是相对比较 反正这个高度的就是这个分子量 07/22 12:59
20F:→ greenmoon00: 除非根本跑不开 07/22 12:59