作者migration (migration)
看板Biotech
標題[求救] protein sample煮過頭
時間Tue Mar 22 16:18:42 2022
今天收了蛋白,定量完加好sample buffer,一般都是丟到乾浴槽,95度煮15分鐘
結果沒聽到timer聲音,等發現去收的時候已經煮了45分鐘 ,蓋子有緊、水也還在
想問這樣的sample還跑的出東西嗎QQ
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1F:→ turtle24: 定量完有剩就花15分鐘重配重煮啊 03/22 17:43
2F:推 tynse71864: 我跑過 會有大量 degrade form 建議就丟了吧 03/22 21:42
3F:推 dawnga: 我也跑過 是覺得沒有到需要很擔心的程度 可以跑看看 我 03/23 02:50
4F:→ dawnga: 有一次加熱完忘記冰 也還好 但不要這麼粗心啦 我那時 03/23 02:50
5F:→ dawnga: 候真的太忙很多實驗疊在一起了 03/23 02:50
6F:推 MartianIT: 看蛋白質本身特性 有的序列容易degrade或氧化 03/23 10:49
7F:→ migration: 自己來回覆一下,今天跑了internal control跟p-NF-kB, 03/24 15:17
8F:→ migration: 是都有跑出來,major band還滿清楚(p-NF-kB背景髒一點 03/24 15:17
9F:→ migration: ),看起來有驚無險 03/24 15:17
10F:推 dawnga: 你的帳號居然是migration 03/24 22:05
咦?對啊,是認識的人嗎QQ
11F:推 bob79620: 爆掉啦 03/24 23:25
12F:→ Ice9: 可是這結果也無法放在最終結論裡吧?不然還得在實驗方法中 03/27 16:57
對啊,但因為是還在抓條件,所以還好
13F:→ Ice9: 加註煮過頭……另外,內容物有沒有少還要看稱重。 03/27 16:57
※ 編輯: migration (27.246.193.75 臺灣), 03/30/2022 17:40:04
※ 編輯: migration (27.246.193.75 臺灣), 03/30/2022 17:40:44
14F:推 pent: 蓋子打開的話,就變超濃縮了 XD 03/31 15:51
15F:推 mor05431: 上面說有些序列容易degrade?線性化後每個地方都是peptid 05/26 23:43
16F:→ mor05431: e bond。序列是什麼理論上沒差吧?(我也有degrade的問 05/26 23:43
17F:→ mor05431: 題想求證原因 05/26 23:43
18F:→ hohotest: 個人淺見 硬要說應該是還原劑2-ME或DTT因水分少濃度變高 11/08 23:59
19F:→ hohotest: 我試過不同濃度還原劑 western gel smear form 會增加 11/09 00:04
20F:→ hohotest: 雖說都是一級結構 但還是有可能因溫度變高 還原劑變高 11/09 00:05
21F:→ hohotest: 有點影響 11/09 00:06