作者dawnga (Dawn)
看板Biotech
標題[求救] 求救 medium不小心加熱到62度能用嗎？
時間Mon Jan 3 16:14:46 2022
養細胞用的medium/DMEM+10%FBS
剛剛準備繼代，使用前用水浴槽加熱
我們的水浴槽是壞的（無法恆溫）
會一路一直升溫
（從20度到40度約5分鐘）
（40度到60度不到十分鐘）
因為忘記按計時器去關掉
剛剛一路從室溫20度加熱到62度
在62度時被我發現
請問這樣medium還能用嗎？
謝謝
補充：有聽說去補體是56度30分鐘
我的medium從56度升到62度應該只有三分鐘
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1F：→ robbercat: 可以取一點medium出來養養看01/03 19:22
好的！謝謝
2F：→ xxtomnyxx: 看你養什麼細胞，239T的話我想是沒問題01/03 20:06
3F：推 tynse71864: 同一樓 這個最簡單01/04 01:44
4F：→ tynse71864: 或是就直接丟了 省得後續實驗問題抓不完01/04 01:44
也是 總比日後有問題還要懷疑medium
5F：→ xxtomnyxx: 如果你這個 medium 是要做 assay 的，建議你換新的；如01/04 02:41
6F：→ xxtomnyxx: 果是純粹拿來 maintain culture，我覺得還好，頂多補 101/04 02:44
7F：→ xxtomnyxx: 倍 glutamine；不過除非你這罐體積很大(超過500 mL)，01/04 02:45
8F：→ xxtomnyxx: 實驗室又很摳，不然的確倒掉配新的最安全。01/04 02:46
了解！最後決定換掉了 謝謝
9F：→ untilnow: 一台水浴槽沒多少錢, 換一台吧01/04 17:27
10F：推 agagy: 1. 配新的，不要浪費時間去測試01/04 17:50
11F：→ agagy: 2. 快換一台水浴槽，實驗室沒經費叫老師自己掏錢買01/04 17:50
12F：→ agagy: 省錢不是這樣省的….01/04 17:52
老師其實知道這件事==
13F：→ blence: 拿來當wash buffer,或是細胞detach後拿去離心前當trypsin01/04 18:15
14F：→ blence: neutralization buffer01/04 18:16
15F：→ blence: 以這加熱速度,62度應該也不是medium裡面的溫度01/04 18:20
對！我也是這樣想的！但是避免疙瘩還是換掉了
16F：推 kubon111: 弱弱的問 medium這樣溫度過高對細胞生長會有特別的影響01/04 21:07
17F：→ kubon111: 嗎01/04 21:07
18F：→ xxtomnyxx: Medium base 本身的 glutamine 高溫容易降解，如果已01/04 23:59
19F：→ xxtomnyxx: 經加了 serum，serum中的 growth factors 有可能回變01/04 23:59
20F：→ xxtomnyxx: 性失去作用導致細胞缺乏生長訊號而死亡。現在其實只要01/04 23:59
21F：→ xxtomnyxx: 不是做免疫相關、對補體敏感的細胞培養，都還建議連5601/04 23:59
22F：→ xxtomnyxx: 度30分鐘的去補體都不要做了 01/04 23:59
23F：推 lemonteas: Medium也曾經被別人用56度煮半個小時，繼續養Cancer ce01/05 16:37
24F：→ lemonteas: ll，他們還是長得很好01/05 16:37
25F：→ lemonteas: 推agagy，擔心的話拿來咖細胞吧!01/05 16:38
26F：推 darlene917: 丟了啦!!不要鬧了!!01/05 17:18
27F：→ darlene917: 你之後養出來做的實驗數據你會想要加註這條嗎?01/05 17:22
28F：→ darlene917: 看推文發現做實驗這麼不嚴謹的人還真多耶 = =!!01/05 17:22
29F：推 darlene917: 剛好用這件事跟PI要求說換一台新的啦!!不然還會再發生01/05 17:31
30F：→ xxtomnyxx: 真的要嚴謹，就直接 define medium 了，用FBS本身就已01/05 17:58
31F：→ xxtomnyxx: 經是不嚴謹的事了(切身體會過換一批FBS就完全做不出來01/05 17:59
32F：→ xxtomnyxx: 的痛苦)，然後樓上說的，用這件事去跟老闆說要換，只會01/05 17:59
33F：→ xxtomnyxx: 被老闆罵說在旁邊好好顧就好，自己不專心怪誰！01/05 18:00
34F：→ xxtomnyxx: 我覺得要不是他們實驗室就是這麼摳，原PO也不會因為這01/05 18:01
35F：→ xxtomnyxx: 點小事跑上來問吧01/05 18:01
你好專業，也好瞭解實驗室生態歐 謝謝你以上的建議
36F：→ a90648: 之前換了一批FBS之後MEL就無法分化了，嚴重的甚至養不活01/05 18:28
好的謝謝
37F：推 MartianIT: 讚成拿來洗細胞或去活trypsin01/05 20:36
好的謝謝
38F：推 agagy: 不知道原PO是養什麼細胞，cell line可能還好，本身就強壯01/05 20:37
39F：→ agagy: 養primary cell 可能直接死給你看..growth factor都失活了01/05 20:38
40F：推 MartianIT: 話說 以前養細胞除了做soft agar culture之外 medium01/05 20:40
41F：→ MartianIT: 我都是冰箱拿出來避光放室溫就用了01/05 20:40
※ 編輯: dawnga (49.215.34.219 臺灣), 01/06/2022 01:25:28
42F：推 leptoneta: FBS只要實驗都用同一批號哪會不嚴謹... 01/08 00:17
43F：推 song4231: 我學弟之前不小心放在學姊設好要設補體的56度裡至少半小 01/29 09:52
44F：→ song4231: 時，後來我提醒他趕快拿出來，還是能用ㄟ 01/29 09:52