作者dawnga (Dawn)
看板Biotech
标题[求救] 求救 medium不小心加热到62度能用吗？
时间Mon Jan 3 16:14:46 2022
养细胞用的medium/DMEM+10%FBS
刚刚准备继代，使用前用水浴槽加热
我们的水浴槽是坏的（无法恒温）
会一路一直升温
（从20度到40度约5分钟）
（40度到60度不到十分钟）
因为忘记按计时器去关掉
刚刚一路从室温20度加热到62度
在62度时被我发现
请问这样medium还能用吗？
谢谢
补充：有听说去补体是56度30分钟
我的medium从56度升到62度应该只有三分钟
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1F：→ robbercat: 可以取一点medium出来养养看01/03 19:22
好的！谢谢
2F：→ xxtomnyxx: 看你养什麽细胞，239T的话我想是没问题01/03 20:06
3F：推 tynse71864: 同一楼 这个最简单01/04 01:44
4F：→ tynse71864: 或是就直接丢了 省得後续实验问题抓不完01/04 01:44
也是 总比日後有问题还要怀疑medium
5F：→ xxtomnyxx: 如果你这个 medium 是要做 assay 的，建议你换新的；如01/04 02:41
6F：→ xxtomnyxx: 果是纯粹拿来 maintain culture，我觉得还好，顶多补 101/04 02:44
7F：→ xxtomnyxx: 倍 glutamine；不过除非你这罐体积很大(超过500 mL)，01/04 02:45
8F：→ xxtomnyxx: 实验室又很抠，不然的确倒掉配新的最安全。01/04 02:46
了解！最後决定换掉了 谢谢
9F：→ untilnow: 一台水浴槽没多少钱, 换一台吧01/04 17:27
10F：推 agagy: 1. 配新的，不要浪费时间去测试01/04 17:50
11F：→ agagy: 2. 快换一台水浴槽，实验室没经费叫老师自己掏钱买01/04 17:50
12F：→ agagy: 省钱不是这样省的….01/04 17:52
老师其实知道这件事==
13F：→ blence: 拿来当wash buffer,或是细胞detach後拿去离心前当trypsin01/04 18:15
14F：→ blence: neutralization buffer01/04 18:16
15F：→ blence: 以这加热速度,62度应该也不是medium里面的温度01/04 18:20
对！我也是这样想的！但是避免疙瘩还是换掉了
16F：推 kubon111: 弱弱的问 medium这样温度过高对细胞生长会有特别的影响01/04 21:07
17F：→ kubon111: 吗01/04 21:07
18F：→ xxtomnyxx: Medium base 本身的 glutamine 高温容易降解，如果已01/04 23:59
19F：→ xxtomnyxx: 经加了 serum，serum中的 growth factors 有可能回变01/04 23:59
20F：→ xxtomnyxx: 性失去作用导致细胞缺乏生长讯号而死亡。现在其实只要01/04 23:59
21F：→ xxtomnyxx: 不是做免疫相关、对补体敏感的细胞培养，都还建议连5601/04 23:59
22F：→ xxtomnyxx: 度30分钟的去补体都不要做了 01/04 23:59
23F：推 lemonteas: Medium也曾经被别人用56度煮半个小时，继续养Cancer ce01/05 16:37
24F：→ lemonteas: ll，他们还是长得很好01/05 16:37
25F：→ lemonteas: 推agagy，担心的话拿来咖细胞吧!01/05 16:38
26F：推 darlene917: 丢了啦!!不要闹了!!01/05 17:18
27F：→ darlene917: 你之後养出来做的实验数据你会想要加注这条吗?01/05 17:22
28F：→ darlene917: 看推文发现做实验这麽不严谨的人还真多耶 = =!!01/05 17:22
29F：推 darlene917: 刚好用这件事跟PI要求说换一台新的啦!!不然还会再发生01/05 17:31
30F：→ xxtomnyxx: 真的要严谨，就直接 define medium 了，用FBS本身就已01/05 17:58
31F：→ xxtomnyxx: 经是不严谨的事了(切身体会过换一批FBS就完全做不出来01/05 17:59
32F：→ xxtomnyxx: 的痛苦)，然後楼上说的，用这件事去跟老板说要换，只会01/05 17:59
33F：→ xxtomnyxx: 被老板骂说在旁边好好顾就好，自己不专心怪谁！01/05 18:00
34F：→ xxtomnyxx: 我觉得要不是他们实验室就是这麽抠，原PO也不会因为这01/05 18:01
35F：→ xxtomnyxx: 点小事跑上来问吧01/05 18:01
你好专业，也好了解实验室生态欧 谢谢你以上的建议
36F：→ a90648: 之前换了一批FBS之後MEL就无法分化了，严重的甚至养不活01/05 18:28
好的谢谢
37F：推 MartianIT: 赞成拿来洗细胞或去活trypsin01/05 20:36
好的谢谢
38F：推 agagy: 不知道原PO是养什麽细胞，cell line可能还好，本身就强壮01/05 20:37
39F：→ agagy: 养primary cell 可能直接死给你看..growth factor都失活了01/05 20:38
40F：推 MartianIT: 话说 以前养细胞除了做soft agar culture之外 medium01/05 20:40
41F：→ MartianIT: 我都是冰箱拿出来避光放室温就用了01/05 20:40
※ 编辑: dawnga (49.215.34.219 台湾), 01/06/2022 01:25:28
42F：推 leptoneta: FBS只要实验都用同一批号哪会不严谨... 01/08 00:17
43F：推 song4231: 我学弟之前不小心放在学姊设好要设补体的56度里至少半小 01/29 09:52
44F：→ song4231: 时，後来我提醒他赶快拿出来，还是能用ㄟ 01/29 09:52