作者Poke0605 (台中彭于晏)
看板Biotech
標題[求救] DNA Purification binding buffer問題
時間Tue Jun 8 17:08:42 2021
大家好
想請問一個關於DNA純化binging buffer問題
在kit（Thermo）打開使用前 ，binging buffer和washing buffer是需要先加酒精的
Protocol 上是寫要加入濃度96%-100%的酒精
但今天如果只加入濃度95%的酒精對於DNA純化會有影響嗎
若影響是會完全抽不出來亦或是只有影響純化品質
謝謝大家的解惑
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1F：→ blence: binding buffer加酒精？ 06/08 19:11
2F：→ Poke0605: 對呀protocol上這樣寫 binging buffer第一次開封需先加 06/08 19:38
3F：→ Poke0605: 入96-100%濃度的酒精 06/08 19:38
4F：推 CSFV: 可能稍微影響純化品質吧，加入酒精目的在於移除鹽類和蛋白質 06/08 20:25
5F：→ CSFV: 同時也帶走水分，避免核酸被水分拉走，所以才會建議濃度越高 06/08 20:27
6F：→ CSFV: 的酒精越好，濃度不夠的話可能得到核酸量也會稍微減少。至於 06/08 20:28
7F：→ CSFV: 是否會影響純化的核酸種類比率？阿肥這點也不太清楚 06/08 20:29
8F：→ CSFV: 個人認為如果後續反應不會受到鹽類干擾的話，95%應急一下是 06/08 20:30
9F：→ CSFV: 無妨啦～ 06/08 20:31
10F：推 tynse71864: 不過95%如果是大桶的工業酒精 (？) 可能會影響到最後D 06/09 11:08
11F：→ tynse71864: NA的純度就是了 06/09 11:09
12F：推 lemonteas: 影響不大，剛開始進實驗室的時候曾經加錯，抽出來跟以 06/09 19:40
13F：→ lemonteas: 前比沒有明顯差異 06/09 19:40
14F：推 lemonteas: 加錯的是plasmid extraction跟gel purification的kit 06/09 19:42
15F：→ Rosmarin: 頂多只會影響純度和品質吧，不至於差個1%就抽不出來啦 06/09 23:30