作者Poke0605 (台中彭于晏)
看板Biotech
标题[求救] DNA Purification binding buffer问题
时间Tue Jun 8 17:08:42 2021
大家好
想请问一个关於DNA纯化binging buffer问题
在kit（Thermo）打开使用前 ，binging buffer和washing buffer是需要先加酒精的
Protocol 上是写要加入浓度96%-100%的酒精
但今天如果只加入浓度95%的酒精对於DNA纯化会有影响吗
若影响是会完全抽不出来亦或是只有影响纯化品质
谢谢大家的解惑
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1F：→ blence: binding buffer加酒精？ 06/08 19:11
2F：→ Poke0605: 对呀protocol上这样写 binging buffer第一次开封需先加 06/08 19:38
3F：→ Poke0605: 入96-100%浓度的酒精 06/08 19:38
4F：推 CSFV: 可能稍微影响纯化品质吧，加入酒精目的在於移除盐类和蛋白质 06/08 20:25
5F：→ CSFV: 同时也带走水分，避免核酸被水分拉走，所以才会建议浓度越高 06/08 20:27
6F：→ CSFV: 的酒精越好，浓度不够的话可能得到核酸量也会稍微减少。至於 06/08 20:28
7F：→ CSFV: 是否会影响纯化的核酸种类比率？阿肥这点也不太清楚 06/08 20:29
8F：→ CSFV: 个人认为如果後续反应不会受到盐类干扰的话，95%应急一下是 06/08 20:30
9F：→ CSFV: 无妨啦～ 06/08 20:31
10F：推 tynse71864: 不过95%如果是大桶的工业酒精 (？) 可能会影响到最後D 06/09 11:08
11F：→ tynse71864: NA的纯度就是了 06/09 11:09
12F：推 lemonteas: 影响不大，刚开始进实验室的时候曾经加错，抽出来跟以 06/09 19:40
13F：→ lemonteas: 前比没有明显差异 06/09 19:40
14F：推 lemonteas: 加错的是plasmid extraction跟gel purification的kit 06/09 19:42
15F：→ Rosmarin: 顶多只会影响纯度和品质吧，不至於差个1%就抽不出来啦 06/09 23:30