作者t0953337796 (芋頭)
看板Biotech
標題[求救] 我的RAW264.7細胞一直活化...
時間Fri Mar 6 13:00:04 2020
如題,我不管是解我們實驗室的細胞或是從食工所買回來的raw264.7都會在解完之後沒多
久開始活化,也就是長腳。
我使用的medium 是直接買Gibco 的liquid的DMEM 再另外加10% low endotoxins 的FBS。
想請教各位是如何培養這株細胞避免他活化的呢?
有沒有大佬可以提供一點這個細胞給我,本人在台中,其他地區也可以,為了畢業我願意
跑XD
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1F:推 darrenyo: 解細胞最好離掉DMSO 2-3天一定要換medium 03/06 13:30
2F:→ darrenyo: 大約7成滿就要繼代 不能長滿 03/06 13:32
3F:推 tynse71864: 想問版上有人raw養到完全不長腳的嗎? 我自己每次都至 03/06 17:37
4F:→ tynse71864: 少會有10-15%左右長腳的... 03/06 17:37
5F:推 seansean4567: 有圖片嗎? 03/06 20:19
6F:→ seansean4567: 前一陣子也很糾結長腳,但傳了幾次圖給BCRC皆說正常 03/06 20:23
7F:→ seansean4567: ,滿一點會變圓。 03/06 20:23
8F:→ seansean4567: 而且你有簡單測一下NO看與LPS誘導的有差別嗎? 03/06 20:25
9F:推 oysterChiu: 建議第一天直接解在dish裡,隔天用PBS wash一下把DMSO 03/07 14:05
10F:→ oysterChiu: 洗掉,換新的medium 03/07 14:05
11F:推 money1015: 要加L-glutamine 03/12 09:58
12F:推 wjlmaxetlott: ATCC上的morphology也是有長腳的 是正常的嗎? 現在 03/16 20:42
13F:→ wjlmaxetlott: 只有養老了才比較圓 03/16 20:42
14F:推 machin: 建議繼代時不能用Trypsin,很容易活化,直接加PBS用力將細胞 03/17 14:42
15F:→ machin: 打下即可 03/17 14:42
16F:→ goodmood1988: Raw容易活化 不要太糾結 不然你的人生會過的很阿雜 03/18 16:32
17F:推 tynse71864: 我後來跟 g 大一樣,只要不是整盤長腳我都繼續用orz 03/20 22:48
18F:推 b0109135: 我會用單包裝的滅菌刮勺輕輕掛來繼代 03/26 09:26
19F:推 sweetE: 我也是用單包裝的刮勺繼代,養在10cm dish裡,細胞泡在10m 06/21 20:36
20F:→ sweetE: l PBS輕刮即可,沒有活化的問題。(by 博士班養了五年的我 06/21 20:36
21F:→ sweetE: ) 06/21 20:36