作者t0953337796 (芋头)
看板Biotech
标题[求救] 我的RAW264.7细胞一直活化...
时间Fri Mar 6 13:00:04 2020
如题,我不管是解我们实验室的细胞或是从食工所买回来的raw264.7都会在解完之後没多
久开始活化,也就是长脚。
我使用的medium 是直接买Gibco 的liquid的DMEM 再另外加10% low endotoxins 的FBS。
想请教各位是如何培养这株细胞避免他活化的呢?
有没有大佬可以提供一点这个细胞给我,本人在台中,其他地区也可以,为了毕业我愿意
跑XD
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1F:推 darrenyo: 解细胞最好离掉DMSO 2-3天一定要换medium 03/06 13:30
2F:→ darrenyo: 大约7成满就要继代 不能长满 03/06 13:32
3F:推 tynse71864: 想问版上有人raw养到完全不长脚的吗? 我自己每次都至 03/06 17:37
4F:→ tynse71864: 少会有10-15%左右长脚的... 03/06 17:37
5F:推 seansean4567: 有图片吗? 03/06 20:19
6F:→ seansean4567: 前一阵子也很纠结长脚,但传了几次图给BCRC皆说正常 03/06 20:23
7F:→ seansean4567: ,满一点会变圆。 03/06 20:23
8F:→ seansean4567: 而且你有简单测一下NO看与LPS诱导的有差别吗? 03/06 20:25
9F:推 oysterChiu: 建议第一天直接解在dish里,隔天用PBS wash一下把DMSO 03/07 14:05
10F:→ oysterChiu: 洗掉,换新的medium 03/07 14:05
11F:推 money1015: 要加L-glutamine 03/12 09:58
12F:推 wjlmaxetlott: ATCC上的morphology也是有长脚的 是正常的吗? 现在 03/16 20:42
13F:→ wjlmaxetlott: 只有养老了才比较圆 03/16 20:42
14F:推 machin: 建议继代时不能用Trypsin,很容易活化,直接加PBS用力将细胞 03/17 14:42
15F:→ machin: 打下即可 03/17 14:42
16F:→ goodmood1988: Raw容易活化 不要太纠结 不然你的人生会过的很阿杂 03/18 16:32
17F:推 tynse71864: 我後来跟 g 大一样,只要不是整盘长脚我都继续用orz 03/20 22:48
18F:推 b0109135: 我会用单包装的灭菌刮勺轻轻挂来继代 03/26 09:26
19F:推 sweetE: 我也是用单包装的刮勺继代,养在10cm dish里,细胞泡在10m 06/21 20:36
20F:→ sweetE: l PBS轻刮即可,没有活化的问题。(by 博士班养了五年的我 06/21 20:36
21F:→ sweetE: ) 06/21 20:36