作者s505015 (s505015b大)
看板Biotech
標題[求救] Elisa standard 的問題
時間Sun May 19 22:48:33 2019
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
若是求救事項涉及實驗室智慧財產(例如細胞細菌植株、質體載體等）之分讓，
請務必註明貴實驗室願意設立 正式合作或 簽署材料分讓協議(MTA)，否則版工將逕行刪
除
----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章----
如題
最近做Elisa
也跑出一些東西
但是有件很奇怪的事
我是測ova antibody
是用direct Elisa
Elisa中做出來的standard是用序列稀釋
但是standard做出來
會是有點曲線
像這個樣子
https://i.imgur.com/1CuHvSb.jpg
當時覺得怪
但是看到有些人說把濃度取log2
就可以
我自己用也發現會很合
但是我印象elisa是用beer law
所以取log2就很奇怪
而且如果是beer law
那吸光值會正比濃度
但是也fit不起來
其他人做出來也是這樣
請大家幫幫忙
給點提示
謝謝
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 1.162.61.70
※ 文章網址: https://webptt.com/m.aspx?n=bbs/Biotech/M.1558277315.A.97B.html
1F：推 qumai: 不奇怪吧,本來線性關係就在一定的濃度範圍裡 05/20 07:32
2F：→ qumai: ELISA還要考慮immobilize,你antigen濃度高到把well都 05/20 07:34
3F：→ qumai: 填滿之後就不可能是線性了 05/20 07:35
4F：推 huangsw: 簡單的說就是你的線性範圍有限 把高濃度踢掉應該就會直了 05/20 12:35
5F：→ huangsw: 可以考慮加高substrate濃度看看吸光能不能拉上來 05/20 12:36
6F：→ s505015: 不能 05/20 15:32
7F：推 Ianthegood: 本來就不會是線性吧 而且好像也沒人真的fit log的方程 05/20 15:37
8F：→ Ianthegood: 式都馬挑兩個點內插 05/20 15:37
9F：→ s505015: 但這樣挑會不會很危險 05/20 17:46
10F：推 Ianthegood: 會在那個ball park啊 需要那麼精準定量你就打MS或AAA 05/20 21:56
11F：→ Ianthegood: 吧 05/20 21:56
12F：→ Ianthegood: 挑最近的兩個點一上一下 差也不會差到看不到整體的tre 05/20 21:58
13F：→ Ianthegood: nd 05/20 21:58
14F：推 lail: 不然就把樣本稀釋到吸光值落在你覺得可信的線性範圍內去比？ 05/26 15:35
15F：→ s505015: 也是可以 但是蠻麻煩ㄉ 05/27 16:34
16F：推 Ianthegood: 啊你就用log去fit啊 也沒差 05/27 17:08
17F：→ qumai: 通常就是稀釋啦 05/29 09:33
18F：推 duriamon: 去查4 parameter logistic function 06/03 03:03