作者s505015 (s505015b大)
看板Biotech
标题[求救] Elisa standard 的问题
时间Sun May 19 22:48:33 2019
发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
若是求救事项涉及实验室智慧财产(例如细胞细菌植株、质体载体等）之分让，
请务必注明贵实验室愿意设立 正式合作或 签署材料分让协议(MTA)，否则版工将迳行删
除
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如题
最近做Elisa
也跑出一些东西
但是有件很奇怪的事
我是测ova antibody
是用direct Elisa
Elisa中做出来的standard是用序列稀释
但是standard做出来
会是有点曲线
像这个样子
https://i.imgur.com/1CuHvSb.jpg
当时觉得怪
但是看到有些人说把浓度取log2
就可以
我自己用也发现会很合
但是我印象elisa是用beer law
所以取log2就很奇怪
而且如果是beer law
那吸光值会正比浓度
但是也fit不起来
其他人做出来也是这样
请大家帮帮忙
给点提示
谢谢
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1F：推 qumai: 不奇怪吧,本来线性关系就在一定的浓度范围里 05/20 07:32
2F：→ qumai: ELISA还要考虑immobilize,你antigen浓度高到把well都 05/20 07:34
3F：→ qumai: 填满之後就不可能是线性了 05/20 07:35
4F：推 huangsw: 简单的说就是你的线性范围有限 把高浓度踢掉应该就会直了 05/20 12:35
5F：→ huangsw: 可以考虑加高substrate浓度看看吸光能不能拉上来 05/20 12:36
6F：→ s505015: 不能 05/20 15:32
7F：推 Ianthegood: 本来就不会是线性吧 而且好像也没人真的fit log的方程 05/20 15:37
8F：→ Ianthegood: 式都马挑两个点内插 05/20 15:37
9F：→ s505015: 但这样挑会不会很危险 05/20 17:46
10F：推 Ianthegood: 会在那个ball park啊 需要那麽精准定量你就打MS或AAA 05/20 21:56
11F：→ Ianthegood: 吧 05/20 21:56
12F：→ Ianthegood: 挑最近的两个点一上一下 差也不会差到看不到整体的tre 05/20 21:58
13F：→ Ianthegood: nd 05/20 21:58
14F：推 lail: 不然就把样本稀释到吸光值落在你觉得可信的线性范围内去比？ 05/26 15:35
15F：→ s505015: 也是可以 但是蛮麻烦ㄉ 05/27 16:34
16F：推 Ianthegood: 啊你就用log去fit啊 也没差 05/27 17:08
17F：→ qumai: 通常就是稀释啦 05/29 09:33
18F：推 duriamon: 去查4 parameter logistic function 06/03 03:03