先唸一下 常常看到這種發問的 細節都只交待一半 這等於是要板友不是幫你抓蟲 而是把"所有"可能出錯的地方都點出來 : 目前使用此款kit分析細胞存活率，使用的 kit的原理是什麼? 在大部分人都用MTT的情況下你期待板友還得自己去估狗再來 幫你抓蟲? 還是你只希望有用過這個kit的少數板友來回答? : 波長為460nm，參考波長650nm。 這個是重點, 所以你是以650當作blank? : 遇到一個問題是： : Blank的值落在0.075上下 : Sample分為3組 : 第一組：0.13 : 第二組0.03 : 第三組：0.078 所以我說 三組處理分別是什麼? : 第三組的吸收值接近背景值，想說可能沒什麼 : 活細胞，但第二組比背景低更多，想請問有哪些可能會造成吸收值比背景低很多？ : 每一組n=4，數值彼此都滿接近，使用的培養液有用含有phenol red跟不含phenol red， : 做出來第二組的樣品都呈現一樣趨勢。 讀值的標準差? 這個差異會不會是機器的誤差造成的? 或是pipetting error? 每一組n=4, 但是每個n只跑一個well? (我假設你是用96-well reader, 你又沒講) 最顯而易見的原因就是你的機器拿650當blank, 然後你第二組有某個東西很吃650 你的處理會不會跟medium跟kit裡面的東西反應? 你有看過raw spectra? 460跟650看起來正常? 你的blank是水? 你有拿123組的medium讀過嗎? 你的proper negative control應該是每種medium only不加細胞, 另外還要再做水 你有上過顯微鏡(搭配vital stain)或是用其他的kit驗證你這個kit的結果嗎? 同時建議, 實驗室化學背景的博後說, 每個sample上機都得做repetition 統計才有意義, 最好在well上面還要randomise排列不過有點太麻煩 : 感謝大家 不客氣, 加油 --

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