先念一下 常常看到这种发问的 细节都只交待一半 这等於是要板友不是帮你抓虫 而是把"所有"可能出错的地方都点出来 : 目前使用此款kit分析细胞存活率，使用的 kit的原理是什麽? 在大部分人都用MTT的情况下你期待板友还得自己去估狗再来 帮你抓虫? 还是你只希望有用过这个kit的少数板友来回答? : 波长为460nm，参考波长650nm。 这个是重点, 所以你是以650当作blank? : 遇到一个问题是： : Blank的值落在0.075上下 : Sample分为3组 : 第一组：0.13 : 第二组0.03 : 第三组：0.078 所以我说 三组处理分别是什麽? : 第三组的吸收值接近背景值，想说可能没什麽 : 活细胞，但第二组比背景低更多，想请问有哪些可能会造成吸收值比背景低很多？ : 每一组n=4，数值彼此都满接近，使用的培养液有用含有phenol red跟不含phenol red， : 做出来第二组的样品都呈现一样趋势。 读值的标准差? 这个差异会不会是机器的误差造成的? 或是pipetting error? 每一组n=4, 但是每个n只跑一个well? (我假设你是用96-well reader, 你又没讲) 最显而易见的原因就是你的机器拿650当blank, 然後你第二组有某个东西很吃650 你的处理会不会跟medium跟kit里面的东西反应? 你有看过raw spectra? 460跟650看起来正常? 你的blank是水? 你有拿123组的medium读过吗? 你的proper negative control应该是每种medium only不加细胞, 另外还要再做水 你有上过显微镜(搭配vital stain)或是用其他的kit验证你这个kit的结果吗? 同时建议, 实验室化学背景的博後说, 每个sample上机都得做repetition 统计才有意义, 最好在well上面还要randomise排列不过有点太麻烦 : 感谢大家 不客气, 加油 --

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