作者pttyoyoloxa (嘉義周星馳)
看板Biotech
標題[討論] 水浴鍋替代方案
時間Fri Dec 21 00:49:24 2018
小弟最近要進行質體transformation 有一步驟是利用水浴鍋heat shock
想請問各位大大可以使用乾浴槽代替嗎?
會有啥影響嗎?
感謝萬分
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1F：推 Ianthegood: 坑裡面噴點水 不然efficiency會降低 12/21 02:10
2F：推 tomshu: 也可以拉長到90秒 12/21 04:52
3F：推 untilnow: 火鍋涮肉片只要10秒，你放100度預熱烤箱10秒會得到? 12/21 07:16
4F：推 osla30: 一直都用乾浴槽 12/21 08:18
5F：推 chawfyg: 重點是HEAT SHOCK的溫度啊 你溫度有到用什麼麻可以 12/21 09:52
6F：→ blence: 火鍋肉片有水跑進肉組織裡，應該不能類比 12/21 10:34
7F：→ xxtomnyxx: 要比喻應該用水煮蛋，但是有人會用烤箱烤完整的蛋嗎？ 12/21 11:58
8F：→ turtle24: 控土窯放雞蛋算嗎 12/21 12:34
9F：推 eric2853: 上面的人講成這樣...一直都用乾浴 做出來沒問題 要延長 12/21 13:13
10F：→ eric2853: 到90秒就好 12/21 13:13
11F：推 untilnow: 用的工具不同 達到你要的溫度時間也不同 12/21 16:06
12F：→ xxtomnyxx: 不是阿，我只是想表達相較於水浴，乾浴的空氣傳導效率 12/21 20:01
13F：→ xxtomnyxx: 要差的多而已，畢竟蛋還是烤的熟。不過我用 水浴槽 和 12/21 20:02
14F：→ xxtomnyxx: ThermoMixer C 做 transform，用水浴槽做的效率明顯高 12/21 20:02
15F：→ xxtomnyxx: 的多 12/21 20:02
16F：推 tynse71864: 同 x 大； 兩者我都試過，但空氣傳導效率會相對差些， 12/22 08:16
17F：→ tynse71864: 故時間要稍微拉長 12/22 08:16
18F：→ tynse71864: 重點是插隻溫度計到機器上 12/22 08:17
19F：推 a10s07: 以前我們都用乾浴給你參考 12/22 18:17
20F：→ blence: 說乾浴是空氣導熱的說法有點怪，那是沒先試過eppendoff跟 12/22 18:43
21F：→ blence: 機器有沒貼合的問題 12/22 18:45
22F：推 osla30: 乾浴槽底部尖的，1.5ml tube就不用加水 12/22 22:29
23F：→ Ianthegood: 再尖都不會是完美閉合啊 12/23 18:30
24F：→ xxtomnyxx: ThermoMixer C 的加熱台是類似矽膠的具有些許彈性的材 12/23 19:18
25F：→ xxtomnyxx: 質，而且實驗室買的加熱台是針對 1.5 mL 離心管設計的 12/23 19:18
26F：→ xxtomnyxx: ，即使如此做 heatshock 效果還是大輸水浴槽，可見再好 12/23 19:19
27F：→ xxtomnyxx: 的設計都比不上水浴的直接接觸傳導，當然不是說乾浴不 12/23 19:20
28F：→ xxtomnyxx: 能用，只是如果有水浴我不會選乾浴做 heatshock 這種需 12/23 19:20
29F：→ xxtomnyxx: 要控制好時間的處理。其他長時間 incubate 的時驗我倒 12/23 19:21
30F：→ xxtomnyxx: 是愛死 thermoMixer 了 XD 12/23 19:22
31F：→ blence: 如果乾浴跟水浴的溫度傳導差那麼多,應該要了解為什麼要放 12/23 22:13
32F：→ blence: 太多體積的competent cell才是,前面才有討論PCR機器升降溫 12/23 22:14
33F：→ blence: 問題,同樣是精準溫控,現代可沒有人用水浴做PCR了阿 12/23 22:16
34F：→ Barolo: pcr機器不用水浴是為了能快速升降溫阿 水要怎麼快速的從 12/24 02:44
35F：→ Barolo: 60 70 衝到95 再降回60 70? 12/24 02:45
36F：→ blence: 這時候就不怕PCR機器導熱不佳嗎？當然是用三個水浴槽阿 12/24 05:11
37F：推 untilnow: 如果你pcr一罐十cc ，可考慮用水浴槽 12/24 08:28
38F：推 osla30: 樓上說法可以同理反問，competent cell會10cc嗎？ 12/24 08:50
39F：→ xxtomnyxx: 可是瑞凡，我做 transform 每管只用 10~15 uL 12/24 11:43
40F：推 michealking: 不是乾浴槽加個水就好了嗎...... 12/24 16:16
41F：→ michealking: 然後記得放溫度計... 12/24 16:17
42F：推 MIWAKO2014: 我都用乾浴槽90秒。 12/26 00:52
43F：推 qazbamboo: 你買的勝任細胞夠好就沒那個問題了 01/05 01:11
44F：→ Ianthegood: 加點水就可以解決的事情 錢省下來買藥不好嗎 01/05 15:02
45F：推 micocat: 買不用heat shock的competent cell 02/01 00:01