作者pttyoyoloxa (嘉义周星驰)
看板Biotech
标题[讨论] 水浴锅替代方案
时间Fri Dec 21 00:49:24 2018
小弟最近要进行质体transformation 有一步骤是利用水浴锅heat shock
想请问各位大大可以使用乾浴槽代替吗?
会有啥影响吗?
感谢万分
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1F：推 Ianthegood: 坑里面喷点水 不然efficiency会降低 12/21 02:10
2F：推 tomshu: 也可以拉长到90秒 12/21 04:52
3F：推 untilnow: 火锅涮肉片只要10秒，你放100度预热烤箱10秒会得到? 12/21 07:16
4F：推 osla30: 一直都用乾浴槽 12/21 08:18
5F：推 chawfyg: 重点是HEAT SHOCK的温度啊 你温度有到用什麽麻可以 12/21 09:52
6F：→ blence: 火锅肉片有水跑进肉组织里，应该不能类比 12/21 10:34
7F：→ xxtomnyxx: 要比喻应该用水煮蛋，但是有人会用烤箱烤完整的蛋吗？ 12/21 11:58
8F：→ turtle24: 控土窑放鸡蛋算吗 12/21 12:34
9F：推 eric2853: 上面的人讲成这样...一直都用乾浴 做出来没问题 要延长 12/21 13:13
10F：→ eric2853: 到90秒就好 12/21 13:13
11F：推 untilnow: 用的工具不同 达到你要的温度时间也不同 12/21 16:06
12F：→ xxtomnyxx: 不是阿，我只是想表达相较於水浴，乾浴的空气传导效率 12/21 20:01
13F：→ xxtomnyxx: 要差的多而已，毕竟蛋还是烤的熟。不过我用 水浴槽 和 12/21 20:02
14F：→ xxtomnyxx: ThermoMixer C 做 transform，用水浴槽做的效率明显高 12/21 20:02
15F：→ xxtomnyxx: 的多 12/21 20:02
16F：推 tynse71864: 同 x 大； 两者我都试过，但空气传导效率会相对差些， 12/22 08:16
17F：→ tynse71864: 故时间要稍微拉长 12/22 08:16
18F：→ tynse71864: 重点是插只温度计到机器上 12/22 08:17
19F：推 a10s07: 以前我们都用乾浴给你参考 12/22 18:17
20F：→ blence: 说乾浴是空气导热的说法有点怪，那是没先试过eppendoff跟 12/22 18:43
21F：→ blence: 机器有没贴合的问题 12/22 18:45
22F：推 osla30: 乾浴槽底部尖的，1.5ml tube就不用加水 12/22 22:29
23F：→ Ianthegood: 再尖都不会是完美闭合啊 12/23 18:30
24F：→ xxtomnyxx: ThermoMixer C 的加热台是类似矽胶的具有些许弹性的材 12/23 19:18
25F：→ xxtomnyxx: 质，而且实验室买的加热台是针对 1.5 mL 离心管设计的 12/23 19:18
26F：→ xxtomnyxx: ，即使如此做 heatshock 效果还是大输水浴槽，可见再好 12/23 19:19
27F：→ xxtomnyxx: 的设计都比不上水浴的直接接触传导，当然不是说乾浴不 12/23 19:20
28F：→ xxtomnyxx: 能用，只是如果有水浴我不会选乾浴做 heatshock 这种需 12/23 19:20
29F：→ xxtomnyxx: 要控制好时间的处理。其他长时间 incubate 的时验我倒 12/23 19:21
30F：→ xxtomnyxx: 是爱死 thermoMixer 了 XD 12/23 19:22
31F：→ blence: 如果乾浴跟水浴的温度传导差那麽多,应该要了解为什麽要放 12/23 22:13
32F：→ blence: 太多体积的competent cell才是,前面才有讨论PCR机器升降温 12/23 22:14
33F：→ blence: 问题,同样是精准温控,现代可没有人用水浴做PCR了阿 12/23 22:16
34F：→ Barolo: pcr机器不用水浴是为了能快速升降温阿 水要怎麽快速的从 12/24 02:44
35F：→ Barolo: 60 70 冲到95 再降回60 70? 12/24 02:45
36F：→ blence: 这时候就不怕PCR机器导热不佳吗？当然是用三个水浴槽阿 12/24 05:11
37F：推 untilnow: 如果你pcr一罐十cc ，可考虑用水浴槽 12/24 08:28
38F：推 osla30: 楼上说法可以同理反问，competent cell会10cc吗？ 12/24 08:50
39F：→ xxtomnyxx: 可是瑞凡，我做 transform 每管只用 10~15 uL 12/24 11:43
40F：推 michealking: 不是乾浴槽加个水就好了吗...... 12/24 16:16
41F：→ michealking: 然後记得放温度计... 12/24 16:17
42F：推 MIWAKO2014: 我都用乾浴槽90秒。 12/26 00:52
43F：推 qazbamboo: 你买的胜任细胞够好就没那个问题了 01/05 01:11
44F：→ Ianthegood: 加点水就可以解决的事情 钱省下来买药不好吗 01/05 15:02
45F：推 micocat: 买不用heat shock的competent cell 02/01 00:01