作者MADAOTW (MADAO)
看板Biotech
標題[討論] trizol 抽RNA時的問題
時間Sat Nov 17 20:44:33 2018
我是抽 cell culture 的 RNA
一般來說 protocol 會要求加 chloroform 後強力 vortex 2分鐘，離心後會有明顯均勻
的三層。
但是其它地方好像也有上下搖晃十幾下就好的方式，離心後最下方就會有不均勻透明層出
現
https://youtu.be/_nm2gzac-qw
想問一下有人知道這兩種做法抽出來的 RNA 的 260/280 260/230 quality 或是濃度有甚
麼不同之處嗎？
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1F：推 vancent: 重點是isopropanol沉澱久一點 其他還好 個人建議不要vort11/17 21:54
2F：→ vancent: ex11/17 21:54
3F：推 iyorain: 混勻後放冰上靜置，分層後再離心效果會好些11/17 23:25
4F：→ iyorain: invert就可11/17 23:26
所以為了怕避免 DNA 或 chromatin 污染不建議vortex就是了是吧
※ 編輯: MADAOTW (123.194.160.138), 11/18/2018 00:11:14
※ 編輯: MADAOTW (123.194.160.138), 11/18/2018 00:11:41
5F：→ Ianthegood: 怕你把rna搖斷 ph會把dna推到interface 11/18 05:54