作者s505015 (s505015)
看板Biotech
標題[求救] 請問如何把抗原從抗體上分離
時間Mon Nov 5 17:03:43 2018
發問時請注意,若是要問實驗相關的問題,請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
若是求救事項涉及實驗室智慧財產(例如細胞細菌植株、質體載體等)之分讓,
請務必註明貴實驗室願意設立 正式合作或 簽署材料分讓協議(MTA),否則版工將逕行刪
除
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大家好
請問一下如何把抗原從抗體上分離
因為抗原還要跑Elisa
有想到用edta
有沒有方向
謝謝
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1F:→ xxtomnyxx: 這應該要看你的抗體是什麼形式的吧?11/05 17:46
2F:→ xxtomnyxx: 呃,我的意思是,你用什麼方法純化你的抗原的?11/05 17:47
實驗很簡單
就是把抗體丟到一個包有抗體的材料
然後再把抗原用下來
看這個材料復合物能抓多少抗原
※ 編輯: s505015 (1.162.41.148), 11/05/2018 21:09:20
3F:推 cyc5566: 抗原抗體接合是共價鍵 應該往化學方法嘗試 我猜有點像Wes 11/06 00:50
4F:→ cyc5566: tern blot的stripping11/06 00:50
5F:→ ag23oni: 樓上的生化老師很火在你後面11/06 03:13
6F:推 POKERFACE: 抗原抗體是非共價鍵結,可以加酸抑制氫鍵以溶離11/06 04:14
7F:→ xxtomnyxx: 抗原抗體的結合是凡德瓦、親水疏水力、氫鍵和電荷引力11/06 04:51
8F:→ xxtomnyxx: 的組合,就是沒有共價鍵XD11/06 04:51
9F:→ xxtomnyxx: 用強酸理論上能讓抗原掉下來,但是如果你的抗體和材料11/06 04:51
10F:→ xxtomnyxx: 不是共價鍵接上去的話,抗體也有可能會掉,我顧慮的是11/06 04:51
11F:→ xxtomnyxx: 抗體會掉的話會不會影響你後面的實驗。11/06 04:51
其實我覺得可能會有一點
因為接下來收下的抗原是用elisa來跑
怕有麻煩
※ 編輯: s505015 (1.162.41.148), 11/06/2018 07:45:39
12F:推 july81212: 酸洗下來趕快置換回中性buffer 基本上抗原抗體都還能11/06 09:02
13F:→ july81212: 用 只是多少酸都會denature 不過抗原denature 應該比 11/06 09:02
14F:→ july81212: 較沒關係除非你抗體設計的epitope 目標是在native時跟 11/06 09:02
15F:→ july81212: 結構有關的區域 11/06 09:02
16F:推 july81212: 另外如果真的怕抗體殘留 就crosslink 到材料上吧11/06 09:04
謝謝大家
※ 編輯: s505015 (223.136.109.27), 11/06/2018 10:42:15
17F:→ Ianthegood: 試試veriblot 11/08 20:43