作者s505015 (s505015)
看板Biotech
标题[求救] 请问如何把抗原从抗体上分离
时间Mon Nov 5 17:03:43 2018
发问时请注意,若是要问实验相关的问题,请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
若是求救事项涉及实验室智慧财产(例如细胞细菌植株、质体载体等)之分让,
请务必注明贵实验室愿意设立 正式合作或 签署材料分让协议(MTA),否则版工将迳行删
除
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大家好
请问一下如何把抗原从抗体上分离
因为抗原还要跑Elisa
有想到用edta
有没有方向
谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 140.109.113.176
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1F:→ xxtomnyxx: 这应该要看你的抗体是什麽形式的吧?11/05 17:46
2F:→ xxtomnyxx: 呃,我的意思是,你用什麽方法纯化你的抗原的?11/05 17:47
实验很简单
就是把抗体丢到一个包有抗体的材料
然後再把抗原用下来
看这个材料复合物能抓多少抗原
※ 编辑: s505015 (1.162.41.148), 11/05/2018 21:09:20
3F:推 cyc5566: 抗原抗体接合是共价键 应该往化学方法尝试 我猜有点像Wes 11/06 00:50
4F:→ cyc5566: tern blot的stripping11/06 00:50
5F:→ ag23oni: 楼上的生化老师很火在你後面11/06 03:13
6F:推 POKERFACE: 抗原抗体是非共价键结,可以加酸抑制氢键以溶离11/06 04:14
7F:→ xxtomnyxx: 抗原抗体的结合是凡德瓦、亲水疏水力、氢键和电荷引力11/06 04:51
8F:→ xxtomnyxx: 的组合,就是没有共价键XD11/06 04:51
9F:→ xxtomnyxx: 用强酸理论上能让抗原掉下来,但是如果你的抗体和材料11/06 04:51
10F:→ xxtomnyxx: 不是共价键接上去的话,抗体也有可能会掉,我顾虑的是11/06 04:51
11F:→ xxtomnyxx: 抗体会掉的话会不会影响你後面的实验。11/06 04:51
其实我觉得可能会有一点
因为接下来收下的抗原是用elisa来跑
怕有麻烦
※ 编辑: s505015 (1.162.41.148), 11/06/2018 07:45:39
12F:推 july81212: 酸洗下来赶快置换回中性buffer 基本上抗原抗体都还能11/06 09:02
13F:→ july81212: 用 只是多少酸都会denature 不过抗原denature 应该比 11/06 09:02
14F:→ july81212: 较没关系除非你抗体设计的epitope 目标是在native时跟 11/06 09:02
15F:→ july81212: 结构有关的区域 11/06 09:02
16F:推 july81212: 另外如果真的怕抗体残留 就crosslink 到材料上吧11/06 09:04
谢谢大家
※ 编辑: s505015 (223.136.109.27), 11/06/2018 10:42:15
17F:→ Ianthegood: 试试veriblot 11/08 20:43