作者steve42125 (DrunkenBlue)
看板Biotech
標題[求救] 如何將96 well的medium和wash去除乾淨
時間Wed Sep 5 15:59:25 2018
大家好
關於96 well在操作上有些問題希望可以請教
最近在利用96 well做細胞在無血清環境中的耐受能力，
實驗是會在96 well內Seeding一定數量的細胞overnight之後，
將medium去除並以PBS wash之後，將實驗組換成不含血清的培養基
但是發現每次在去除medium和wash的PBS之後，
在顯微鏡下都會看到可能有些well內的細胞會突然"空"掉一塊
推測可能是用八爪去掉medium時有不小心刮到
我的操作流程基本上是：
會用八爪插上300ul的tip後再插上20ul的tip去吸掉medium
然後取200ul PBS抵著well的邊邊輕輕加入
再用相同的方式去掉PBS後補回相對應的medium
不知道各位在操作這種要對96 well內細胞去除medium並wash的實驗時
有沒有什麼技巧能不讓細胞有流失
另外想請問在我第一次有先將含血清培養基去乾淨的情況下
96 well以"200ul PBS wash一次"有辦法將血清去除乾淨嗎?
希望能得到各位的經驗分享
謝謝！
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2F：→ steve42125: 我們家只有8爪QQ 細胞是A549和1299 貼附型的肺癌細胞 09/05 18:11
3F：→ steve42125: *H1299 09/05 18:11
4F：推 lail: 也可以考慮用無血清培養基多清洗幾次，一般培養基其實沒很貴 09/05 20:08
5F：→ lail: ，血清比較貴 09/05 20:08
6F：→ steve42125: 對耶 Hmm.. 我都沒想到這個 謝謝你的建議!! 09/05 21:49
7F：推 jabari: 看來你只能練空中甩盤了 PBS補到200 然後甩乾 不用拍盤 09/05 21:53
8F：→ jabari: 重覆兩次必乾淨.. 至少我拿MDCK做TICD50這樣很OK 沒遇過 09/05 21:53
9F：→ jabari: 血清干擾... 問題只在熟練程度而已Orz 09/05 21:53
10F：→ steve42125: 我原本也是想說用這種方式看看XDD 09/05 22:40
11F：→ steve42125: 只是在hood裡面感覺不太好操作哈哈 09/05 22:40
12F：→ steve42125: 方便把甩的動作解說的詳細一點嗎? 09/05 22:41
13F：→ steve42125: 我自己是想說快速反過來向下倒掉液體之後蓋在擦手紙上 09/05 22:44
14F：→ steve42125: 把well洞口的液體沾乾 不知道這樣O不OK? 09/05 22:44
15F：推 jabari: 拿一個乾淨的大petri dish 或大塑膠盆... 倒置之後在空中 09/06 00:48
16F：→ jabari: 向下抖抖抖...震震震 多練幾次就熟練了XD 別用擦手紙啊 09/06 00:48
17F：→ jabari: 我待過某lab是用金貝利面紙拿來吸 因為擦手紙髒髒會污染X 09/06 00:48
18F：→ jabari: D 09/06 00:48
19F：→ jabari: 就我經驗 pbs越多反而甩得越好越乾XD 09/06 00:49
20F：→ MDCCLXXVI: 你是空邊邊 還是空中間？ 09/06 01:22
21F：→ steve42125: jabari: 了解了~ 感謝你的分享XD 09/06 09:26
22F：→ steve42125: MDCC:我是會空最外面一圈~ 09/06 09:27