最近再染大鼠腎臟冷凍切片 前置作業為大鼠灌流取器官>10%蔗糖溶液>20%>30%（各一天）>冷凍切片 要染色當天： 40%福馬林 10min PBS wash 3min *3次 流動水 5min Hematoxylin 20~30 sec 流動水 30sec 0.1%HCL 3times (約5sec) 流動水 30sec Li2CO3 30sec 流動水 5min 95% Ethanol 30sec Eosin 20 sec 50% Ethanol 30sec 75% Ethanol 30sec 95% Ethanol 30sec 100% Ethanol 30 sec Xylene 6min 但染出來的片子H的顏色在細胞質卡色 如果酸洗多一些又會連核的顏色一起洗掉 H的顏色細胞質跟細胞核區分不大，每次染出來的片都很髒，會呈現有點黑色 試了很多H及E和酸洗的比例，結果都是差不多，顏色對比不清楚、核不清楚 一直卡在這個瓶頸很久！ 有天， 試了一個前人留下來的流程 福馬林、PBS後，100%酒精>95%>75%>50%再進行後面一樣的步驟H、酸洗、鹼呈........ 所有條件都一樣，只多加了一個酒精復水 然後做出來的成果卻紅藍分明，細胞核有上色、也沒有在胞質卡藍黑色 意外的成功 - 但是跟學長討論的結果是他覺得這樣的結果很奇怪 1、網路上幾乎查不到將冷凍切片復水的流程 2、因為40%福馬林就是水溶性的以及PBS的步驟已經復水了 想問板上的大師們，我的流程還有什麼會造成這種結果的可能性嗎？ 染色新手，如果過程不夠清楚請多多包涵！ --

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