作者freedom2105 (自由2015)
看板Biotech
標題[求救] 固定劑為何會造成自體螢光
時間Sat Apr 21 21:18:31 2018
各位前輩好
小弟最近做實驗被問到一個問題
為何像是戊二醛、多聚甲醛這類的固定劑會造成自體螢光呢？
小弟不才
我只知道自體螢光可以用來區分螢光標記的光阿…QQ
希望有大大能幫小弟開示一下
感激不盡
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 27.105.31.105
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1F：推 joseph103331: 因為這些化學物質有螢光阿....04/21 21:35
2F：→ joseph103331: 會吸收特定波長 放出特定波長 剛好又落在我們要看的04/21 21:35
3F：→ joseph103331: 地方 就是自體螢光 其他波段愛怎麼吸光放光無所謂啦04/21 21:35
感謝大大講解！我瞭解了
※ 編輯: freedom2105 (27.105.31.105), 04/21/2018 21:38:23
4F：推 short945: paraformaldehyde不是固定劑，要解離以後變成甲醛才是 04/24 22:04
5F：→ short945: 通常glutaraldehyde會造成被固定的組織產生自體螢光 04/24 22:06
6F：→ short945: 但是formaldehyde比較不會 04/24 22:07
7F：→ short945: 自體螢光來自醛基，用glycine耗掉醛基可減少自體螢光 04/24 22:12
8F：→ Ianthegood: 近期看了一篇ms spec的研究 tris比glycine好用喔 04/25 02:16
9F：→ xxtomnyxx: 樓上，用 Tris 太強也不見得是好事，我有次嘗試用 Tris 04/25 14:12
10F：→ xxtomnyxx: quench 結果造成 fixation 失敗..... 04/25 14:12
11F：→ joseph103331: 我都不做quench....XD 真的會有差嗎? 04/25 14:17
12F：→ joseph103331: 比如讓弱的抗體訊號強一點之類的 04/25 14:17
13F：推 tynse71864: 應該是背景會降低 04/25 18:03
14F：→ tynse71864: 雖然有次忘記 quench看起來沒差，不過那是過表現的蛋 04/25 18:03
15F：→ tynse71864: 白 04/25 18:03
16F：→ xxtomnyxx: 我個人是覺得 PBS 洗幾次 free 的 formaldehyde 就被稀 04/25 18:40
17F：→ xxtomnyxx: 釋掉了，有沒有 quench 沒差，我做細胞免疫螢光染色也 04/25 18:41
18F：→ xxtomnyxx: 都沒有在 quench 的 04/25 18:42