作者freedom2105 (自由2015)
看板Biotech
标题[求救] 固定剂为何会造成自体萤光
时间Sat Apr 21 21:18:31 2018
各位前辈好
小弟最近做实验被问到一个问题
为何像是戊二醛、多聚甲醛这类的固定剂会造成自体萤光呢？
小弟不才
我只知道自体萤光可以用来区分萤光标记的光阿…QQ
希望有大大能帮小弟开示一下
感激不尽
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 27.105.31.105
※ 文章网址: https://webptt.com/cn.aspx?n=bbs/Biotech/M.1524316713.A.876.html
1F：推 joseph103331: 因为这些化学物质有萤光阿....04/21 21:35
2F：→ joseph103331: 会吸收特定波长 放出特定波长 刚好又落在我们要看的04/21 21:35
3F：→ joseph103331: 地方 就是自体萤光 其他波段爱怎麽吸光放光无所谓啦04/21 21:35
感谢大大讲解！我了解了
※ 编辑: freedom2105 (27.105.31.105), 04/21/2018 21:38:23
4F：推 short945: paraformaldehyde不是固定剂，要解离以後变成甲醛才是 04/24 22:04
5F：→ short945: 通常glutaraldehyde会造成被固定的组织产生自体萤光 04/24 22:06
6F：→ short945: 但是formaldehyde比较不会 04/24 22:07
7F：→ short945: 自体萤光来自醛基，用glycine耗掉醛基可减少自体萤光 04/24 22:12
8F：→ Ianthegood: 近期看了一篇ms spec的研究 tris比glycine好用喔 04/25 02:16
9F：→ xxtomnyxx: 楼上，用 Tris 太强也不见得是好事，我有次尝试用 Tris 04/25 14:12
10F：→ xxtomnyxx: quench 结果造成 fixation 失败..... 04/25 14:12
11F：→ joseph103331: 我都不做quench....XD 真的会有差吗? 04/25 14:17
12F：→ joseph103331: 比如让弱的抗体讯号强一点之类的 04/25 14:17
13F：推 tynse71864: 应该是背景会降低 04/25 18:03
14F：→ tynse71864: 虽然有次忘记 quench看起来没差，不过那是过表现的蛋 04/25 18:03
15F：→ tynse71864: 白 04/25 18:03
16F：→ xxtomnyxx: 我个人是觉得 PBS 洗几次 free 的 formaldehyde 就被稀 04/25 18:40
17F：→ xxtomnyxx: 释掉了，有没有 quench 没差，我做细胞免疫萤光染色也 04/25 18:41
18F：→ xxtomnyxx: 都没有在 quench 的 04/25 18:42