作者LIAR (玻璃做的大叔)
看板Biotech
標題[討論] Osmotic shock 用NaCl取代KCl有差嗎？
時間Sat Feb 24 12:17:25 2018
我最近想收cell culture的ECM，所以要先去細胞。我用這篇的方式
Comparison of decellularization techniques for preparation of extracellular
matrix scaffolds derived from three-dimensional cell culture
其中作者表示
(2) TX100 + 1.5M KCl Treat with 0.1% TX100 and
1.5M KCl in 50 mM Tris buffer
(pH 8.0) for 6 h. Wash with 10 mM Tris buffer (pH 8.0) and MilliQ water.
With the combination of TX100 extraction and osmotic shock with 1.5M KCl,
cells were disrupted and cell nuclei were removed.
看起來這個方式結果很好，操作也簡單。不過因為實驗室有一堆TBS 10X，如果稀釋成
TBS 3X正好是
Tris 75mM + 1.5M NaCl，只要補triton就好。
因為是要打破細胞，請問這種實驗用鈉離子或鉀離子會有差異嗎？
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起初，他們追殺共產主義者，我沒有說話，因為我不是共產主義者；
接著，他們追殺猶太人，我沒有說話，因為我不是猶太人；
後來，他們追殺工會成員，我沒有說話，因為我不是工會成員；
此後，他們追殺天主教徒，我沒有說話，因為我是新教教徒；
最後，他們奔我而來，卻再也沒有人站起來為我說話了。
《First They Came（他們首次來時）》，Martin Niemoller牧師（1892-1984）
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1F：→ Ianthegood: 何必 KCl又沒多少錢 多一個變因如果出錯更難抓bug 02/24 14:33
2F：→ LIAR: 因為要多幾個瓶子。另外也是因為好奇啦... 02/24 15:48
3F：推 joseph103331: 何不一起試試? Tris跟KCL分開配都還能用在其他地方 02/24 22:18
4F：→ joseph103331: 反正一定也要測試效果,搞不好NaCl效果更好 02/24 22:19
5F：→ LIAR: 好吧！有空來試試。 02/24 23:47
6F：推 silverberry: NaCl 和 KCl 離子強度不一樣，不適合替換。 03/01 17:40
7F：→ silverberry: 但是同意 j 大，試試看說不定 NaCl 在你的系統效果 03/01 17:41
8F：→ silverberry: 更好~ 03/01 17:41