作者LIAR (玻璃做的大叔)
看板Biotech
标题[讨论] Osmotic shock 用NaCl取代KCl有差吗？
时间Sat Feb 24 12:17:25 2018
我最近想收cell culture的ECM，所以要先去细胞。我用这篇的方式
Comparison of decellularization techniques for preparation of extracellular
matrix scaffolds derived from three-dimensional cell culture
其中作者表示
(2) TX100 + 1.5M KCl Treat with 0.1% TX100 and
1.5M KCl in 50 mM Tris buffer
(pH 8.0) for 6 h. Wash with 10 mM Tris buffer (pH 8.0) and MilliQ water.
With the combination of TX100 extraction and osmotic shock with 1.5M KCl,
cells were disrupted and cell nuclei were removed.
看起来这个方式结果很好，操作也简单。不过因为实验室有一堆TBS 10X，如果稀释成
TBS 3X正好是
Tris 75mM + 1.5M NaCl，只要补triton就好。
因为是要打破细胞，请问这种实验用钠离子或钾离子会有差异吗？
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起初，他们追杀共产主义者，我没有说话，因为我不是共产主义者；
接着，他们追杀犹太人，我没有说话，因为我不是犹太人；
後来，他们追杀工会成员，我没有说话，因为我不是工会成员；
此後，他们追杀天主教徒，我没有说话，因为我是新教教徒；
最後，他们奔我而来，却再也没有人站起来为我说话了。
《First They Came（他们首次来时）》，Martin Niemoller牧师（1892-1984）
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1F：→ Ianthegood: 何必 KCl又没多少钱 多一个变因如果出错更难抓bug 02/24 14:33
2F：→ LIAR: 因为要多几个瓶子。另外也是因为好奇啦... 02/24 15:48
3F：推 joseph103331: 何不一起试试? Tris跟KCL分开配都还能用在其他地方 02/24 22:18
4F：→ joseph103331: 反正一定也要测试效果,搞不好NaCl效果更好 02/24 22:19
5F：→ LIAR: 好吧！有空来试试。 02/24 23:47
6F：推 silverberry: NaCl 和 KCl 离子强度不一样，不适合替换。 03/01 17:40
7F：→ silverberry: 但是同意 j 大，试试看说不定 NaCl 在你的系统效果 03/01 17:41
8F：→ silverberry: 更好~ 03/01 17:41