作者s908322001 (小負)
看板Biotech
標題[討論] 關於胞外internal control
時間Fri May 5 12:42:04 2017
各位先輩 各位強者大大大家好
今天對外報告我做的實驗
其中有一個實驗是看細胞胞內胞外蛋白表現量
其中胞內沒什麼問題
就是收細胞定量跑WB，internal control就用蛋白骨架
胞外就是收下condition medium 然後使用濃縮離心管將多餘的medium離下來
然後依照藥物濃度組別load gel，也可以知道藥物濃度越高，胞外蛋白越少
但是剛剛被質疑沒有control，不過實驗室歷年來都是用各個濃度的組別比較
沒加藥的組別，所以想請問各位強者，胞外蛋白有internal control嗎?
還是我們實驗室的做法其實就可以了
先在這謝謝各位了
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1F：推 Bows: total protein也可以，可以用ponceauS 或有些膠可以直接顯出 05/05 13:24
2F：→ Bows: 蛋白量 05/05 13:24
3F：推 tynse71864: 同1F; 若PS染不出東西， WB抗體壓完再染 CMB也可 05/05 13:36
4F：→ memory0907: 可以用Fascin-1 05/05 15:12
5F：→ Ianthegood: 同上total protein 太少就銀染吧 05/06 00:30
6F：推 joseph103331: medium有加血清嗎? 全蛋白質測定可能會有血清影響 05/08 22:18
7F：→ joseph103331: 我覺得只要將各組別的細胞量拿出來做normalize就好 05/08 22:19
8F：推 m21115: 想問一下要怎麼將細胞量定量？刮下來用BCA定量可以嗎？ 05/11 12:21
9F：→ Ianthegood: 要抽完protein才能測啊 直接BCA細胞也太狂XD 05/11 18:56
10F：推 tynse71864: j大應該是指細胞數吧？ 05/15 13:41
11F：推 joseph103331: 我是覺得用細胞內的細胞骨架來當作細胞數normalize 05/18 02:54
12F：→ joseph103331: 就好,但如果還是被質疑的話也只好數細胞了 05/18 02:56