作者s908322001 (小负)
看板Biotech
标题[讨论] 关於胞外internal control
时间Fri May 5 12:42:04 2017
各位先辈 各位强者大大大家好
今天对外报告我做的实验
其中有一个实验是看细胞胞内胞外蛋白表现量
其中胞内没什麽问题
就是收细胞定量跑WB，internal control就用蛋白骨架
胞外就是收下condition medium 然後使用浓缩离心管将多余的medium离下来
然後依照药物浓度组别load gel，也可以知道药物浓度越高，胞外蛋白越少
但是刚刚被质疑没有control，不过实验室历年来都是用各个浓度的组别比较
没加药的组别，所以想请问各位强者，胞外蛋白有internal control吗?
还是我们实验室的做法其实就可以了
先在这谢谢各位了
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1F：推 Bows: total protein也可以，可以用ponceauS 或有些胶可以直接显出 05/05 13:24
2F：→ Bows: 蛋白量 05/05 13:24
3F：推 tynse71864: 同1F; 若PS染不出东西， WB抗体压完再染 CMB也可 05/05 13:36
4F：→ memory0907: 可以用Fascin-1 05/05 15:12
5F：→ Ianthegood: 同上total protein 太少就银染吧 05/06 00:30
6F：推 joseph103331: medium有加血清吗? 全蛋白质测定可能会有血清影响 05/08 22:18
7F：→ joseph103331: 我觉得只要将各组别的细胞量拿出来做normalize就好 05/08 22:19
8F：推 m21115: 想问一下要怎麽将细胞量定量？刮下来用BCA定量可以吗？ 05/11 12:21
9F：→ Ianthegood: 要抽完protein才能测啊 直接BCA细胞也太狂XD 05/11 18:56
10F：推 tynse71864: j大应该是指细胞数吧？ 05/15 13:41
11F：推 joseph103331: 我是觉得用细胞内的细胞骨架来当作细胞数normalize 05/18 02:54
12F：→ joseph103331: 就好,但如果还是被质疑的话也只好数细胞了 05/18 02:56