作者darkbishop (自由山丘上的春樹)
看板Biotech
標題[求救] DTT打斷雙硫鍵
時間Sat Mar 25 22:51:14 2017
大家好
小弟最近做實驗碰壁 想上來請教各位
我做的實驗是將末端帶有HS官能基的DNA修飾在金膜表面
但生技公司提供的是對稱的兩條單股DNA(~~~S--S~~~)
故使用前須加入DTT用以打斷雙硫鍵
看過一篇刊登在small上的論文 裡面說DTT濃度是DNA的10000倍 然後4h incubation
另外去電生技公司博士級專員 他說1000倍 然後至少15min incubation
時間上差蠻多的 濃度也差到10倍 另外也好奇DTT反應速度如何
想聽聽版上先進的意見 作為參考 謝謝大家
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1F：推 xgodtw:樓下你猜marklin的雞雞等下會怎麼樣?06/08 01:23
2F：推 marklin:========================會爆==========================06/08 01:23
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3F：推 david31408: 兩種條件都試試看呀 最多也就是花4小時時間 03/26 14:14
4F：→ darkbishop: y糟糕的是看起來都沒修飾上 03/26 19:01
5F：→ blence: 反應後應該去除DTT才修飾上？ 03/26 19:20
6F：推 Ianthegood: TCEP? 03/27 01:13
7F：→ darkbishop: 可是我用的是非常微量的體積 應該很難除去DTT 03/27 19:18