作者actionkeep (KF)
看板Biotech
標題[求救] 冷凍切片染ihc的問題~
時間Wed Nov 16 09:21:50 2016
小弟想要做冷凍切片 染IHC
取樣時有看到很多前輩說要固定
4%的多聚甲醛固 或放在蔗糖水中梯度脫水
但是有看另一種說法是不固定直接OTC保存(利用液態氮高速降溫減少冰晶?)
想問有前輩有過直接OTC不固定的嗎? 不知道冰晶會不會很多?
因為原本做的是福馬林固定後常規做石蠟切片
但是還要配合脫水機跟其他人配合，所以固定時間會超過48HR
所以才想做冷凍切片看看
順便問一下 有人福馬林固定超過48hr 做石蠟IHC 還染得出來的前輩嗎?
感恩~大家
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1F：→ turtle24: 福馬林隔天換掉就不會超過48hr了吧 11/16 09:55
2F：推 goodday06: 一般常規使用的抗體有註明是冰凍切片還是石蠟包埋用的 11/16 10:42
3F：→ goodday06: 泡福馬林後又冰凍切 好像不是常規做法 11/16 10:45
4F：→ goodday06: 我都otc直接加到新鮮組織 11/16 10:48
5F：推 abcam: 建議蠟塊 給外包廠商做。很省事 11/16 19:48
6F：推 goshr: 固定48天也染得出來呀 11/16 21:16
7F：推 abcam: 固定48天 太可怕了～一抗的抗體鍵結 會有問題 11/16 23:14
8F：推 homeshawn: 液態氮也只是隔著金屬容器內裝異戊烷作降溫喔0.0, 11/30 01:19
9F：→ homeshawn: 做得好確實可以有效減少冰晶 11/30 01:19