作者actionkeep (KF)
看板Biotech
标题[求救] 冷冻切片染ihc的问题~
时间Wed Nov 16 09:21:50 2016
小弟想要做冷冻切片 染IHC
取样时有看到很多前辈说要固定
4%的多聚甲醛固 或放在蔗糖水中梯度脱水
但是有看另一种说法是不固定直接OTC保存(利用液态氮高速降温减少冰晶?)
想问有前辈有过直接OTC不固定的吗? 不知道冰晶会不会很多?
因为原本做的是福马林固定後常规做石蜡切片
但是还要配合脱水机跟其他人配合，所以固定时间会超过48HR
所以才想做冷冻切片看看
顺便问一下 有人福马林固定超过48hr 做石蜡IHC 还染得出来的前辈吗?
感恩~大家
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 59.124.9.153
※ 文章网址: https://webptt.com/cn.aspx?n=bbs/Biotech/M.1479259312.A.203.html
1F：→ turtle24: 福马林隔天换掉就不会超过48hr了吧 11/16 09:55
2F：推 goodday06: 一般常规使用的抗体有注明是冰冻切片还是石蜡包埋用的 11/16 10:42
3F：→ goodday06: 泡福马林後又冰冻切 好像不是常规做法 11/16 10:45
4F：→ goodday06: 我都otc直接加到新鲜组织 11/16 10:48
5F：推 abcam: 建议蜡块 给外包厂商做。很省事 11/16 19:48
6F：推 goshr: 固定48天也染得出来呀 11/16 21:16
7F：推 abcam: 固定48天 太可怕了～一抗的抗体键结 会有问题 11/16 23:14
8F：推 homeshawn: 液态氮也只是隔着金属容器内装异戊烷作降温喔0.0, 11/30 01:19
9F：→ homeshawn: 做得好确实可以有效减少冰晶 11/30 01:19