作者darkdoor (嘆息之門)
看板Biotech
標題[求救] 組織免疫螢光染色
時間Sat Nov 12 19:38:09 2016
最近的實驗是將帶有螢光dye 脂類物質打入小鼠，看其組織的吸收，
因為老闆想看是組織中何種細胞吃進了螢光物質，所以進行了免疫螢光染色，
遇到的問題是染色的過程中需要使用 Triton-X 100 打洞，但是
會造成那個 dye 的消失，不打洞的話抗體又染不上去，
不知道各位前輩有沒有一些特別的做法，可以請教一下，
謝謝。
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 1.162.241.244
※ 文章網址: https://webptt.com/m.aspx?n=bbs/Biotech/M.1478950692.A.708.html
1F：→ MDCCLXXVI: 染細胞表面的marker?11/12 19:52
補充說明一下，抗體有特定而且不是細胞表面的，所以無法更換
※ 編輯: darkdoor (1.162.241.244), 11/12/2016 21:18:37
2F：推 tynse71864: 使用弱一點的 detergent 並降濃度 如 saponin,CHAPS11/12 22:20
3F：→ tynse71864: fix bfr是 PFA?11/12 22:20
是PFA沒錯
※ 編輯: darkdoor (42.72.252.217), 11/13/2016 17:29:39
4F：推 Ianthegood: 用organic solvent fix? 11/14 21:08
5F：→ Ianthegood: 啊大概也會把你的dye洗掉 11/14 21:08
6F：推 tharaohfu: 冷凍切片可試試用-20度C的methanol fix 11/14 23:33
7F：→ tharaohfu: 這樣可以不用打洞 不過還是得試試看 11/14 23:34
8F：推 tynse71864: organic 之前試 ICC ,油類會全部洗掉噢 11/15 09:17
9F：→ enjorus: 有機溶劑類的，油類很多都會被洗掉呀。不過原PO的狀況中 11/15 23:18
10F：→ enjorus: 如果有切片的話，那個厚度應該會小於一顆細胞厚度。 11/15 23:19
11F：→ enjorus: 所以可以試看看跳過打洞那步。 11/15 23:19