作者darkdoor (叹息之门)
看板Biotech
标题[求救] 组织免疫萤光染色
时间Sat Nov 12 19:38:09 2016
最近的实验是将带有萤光dye 脂类物质打入小鼠，看其组织的吸收，
因为老板想看是组织中何种细胞吃进了萤光物质，所以进行了免疫萤光染色，
遇到的问题是染色的过程中需要使用 Triton-X 100 打洞，但是
会造成那个 dye 的消失，不打洞的话抗体又染不上去，
不知道各位前辈有没有一些特别的做法，可以请教一下，
谢谢。
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1F：→ MDCCLXXVI: 染细胞表面的marker?11/12 19:52
补充说明一下，抗体有特定而且不是细胞表面的，所以无法更换
※ 编辑: darkdoor (1.162.241.244), 11/12/2016 21:18:37
2F：推 tynse71864: 使用弱一点的 detergent 并降浓度 如 saponin,CHAPS11/12 22:20
3F：→ tynse71864: fix bfr是 PFA?11/12 22:20
是PFA没错
※ 编辑: darkdoor (42.72.252.217), 11/13/2016 17:29:39
4F：推 Ianthegood: 用organic solvent fix? 11/14 21:08
5F：→ Ianthegood: 啊大概也会把你的dye洗掉 11/14 21:08
6F：推 tharaohfu: 冷冻切片可试试用-20度C的methanol fix 11/14 23:33
7F：→ tharaohfu: 这样可以不用打洞 不过还是得试试看 11/14 23:34
8F：推 tynse71864: organic 之前试 ICC ,油类会全部洗掉噢 11/15 09:17
9F：→ enjorus: 有机溶剂类的，油类很多都会被洗掉呀。不过原PO的状况中 11/15 23:18
10F：→ enjorus: 如果有切片的话，那个厚度应该会小於一颗细胞厚度。 11/15 23:19
11F：→ enjorus: 所以可以试看看跳过打洞那步。 11/15 23:19