作者sam8789 (Déjà vu)
看板Biotech
標題[求救] 養細胞莫名死掉
時間Sat Jul 9 12:47:00 2016
各位好
小弟目前在養ips細胞並加藥讓它分化成肺前驅細胞
protocol是參考其他paper，使用的medium與factor幾乎都與paper相同
之前試著照protocol走個一兩次養起來都沒什麼問題
但是最近在加藥個2~3天後就會全部凋亡，理由還找不太到
以下是小弟想到的可能出問題的地方
1.medium
medium是一開始就事先同時配好2~3瓶，之前試做時都沒問題，我想應該不是medium
的問題
2.汙染
medium中有添加penicillin/streptomycin，之前養了2個月都沒出現汙染，也應該
不是這個問題
3.growth factor
factor是保存在冰箱裡，有需要時再拿出來加入medium中，再分配到各個well
factor有時會用完取新的stock出來解凍，不過其他人也有在用，我別的實驗
也有在用沒有出現問題，應該不是這個因素
想請問有經驗的各位，還有什麼原因會造成細胞凋亡呢
有什麼因素是我忽略的?
感謝大家
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 150.29.55.18
※ 文章網址: https://webptt.com/m.aspx?n=bbs/Biotech/M.1468039623.A.E50.html
1F：→ eric6210: 是不是藥物汙染了? 我看你的三點都沒提到藥物 07/09 13:05
2F：→ eric6210: 另外P/S重複回溫太多次也有可能失活，建議跟medium一起 07/09 13:06
3F：→ eric6210: 重配過 07/09 13:06
4F：→ sam8789: 了解 我是打算這次我做新的還失敗 就全部重配過 07/09 13:20
5F：→ Ianthegood: 是apoptosis嗎 還是necrosis 07/09 21:31
看起來像necrosis
6F：推 alaric: 請先找學長姊及指導教授討論. 07/10 00:15
有找過學長姐討論過 他們養的時候都沒有發生過這種問題 所以想問看看有沒有人
有類似經驗
※ 編輯: sam8789 (133.51.75.51), 07/11/2016 08:23:15