作者sam8789 (Déjà vu)
看板Biotech
标题[求救] 养细胞莫名死掉
时间Sat Jul 9 12:47:00 2016
各位好
小弟目前在养ips细胞并加药让它分化成肺前驱细胞
protocol是参考其他paper，使用的medium与factor几乎都与paper相同
之前试着照protocol走个一两次养起来都没什麽问题
但是最近在加药个2~3天後就会全部凋亡，理由还找不太到
以下是小弟想到的可能出问题的地方
1.medium
medium是一开始就事先同时配好2~3瓶，之前试做时都没问题，我想应该不是medium
的问题
2.污染
medium中有添加penicillin/streptomycin，之前养了2个月都没出现污染，也应该
不是这个问题
3.growth factor
factor是保存在冰箱里，有需要时再拿出来加入medium中，再分配到各个well
factor有时会用完取新的stock出来解冻，不过其他人也有在用，我别的实验
也有在用没有出现问题，应该不是这个因素
想请问有经验的各位，还有什麽原因会造成细胞凋亡呢
有什麽因素是我忽略的?
感谢大家
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc), 来自: 150.29.55.18
※ 文章网址: https://webptt.com/cn.aspx?n=bbs/Biotech/M.1468039623.A.E50.html
1F：→ eric6210: 是不是药物污染了? 我看你的三点都没提到药物 07/09 13:05
2F：→ eric6210: 另外P/S重复回温太多次也有可能失活，建议跟medium一起 07/09 13:06
3F：→ eric6210: 重配过 07/09 13:06
4F：→ sam8789: 了解 我是打算这次我做新的还失败 就全部重配过 07/09 13:20
5F：→ Ianthegood: 是apoptosis吗 还是necrosis 07/09 21:31
看起来像necrosis
6F：推 alaric: 请先找学长姊及指导教授讨论. 07/10 00:15
有找过学长姐讨论过 他们养的时候都没有发生过这种问题 所以想问看看有没有人
有类似经验
※ 编辑: sam8789 (133.51.75.51), 07/11/2016 08:23:15