作者nellnell (小厚)
看板Biotech
標題[求救] DNA疑似污染
時間Fri Jun 17 16:12:50 2016
小弟最近在做transfection 用的是K2 reagent
結果剛剛去拍照 發現都死光了..
不過神奇的是control組跟其他沒用到的well(我是種在96 well)都活的好好的，所以助理
說可能是DNA或是transfection reagent有污染
想請問有沒有人有這種經驗 DNA跟reagent又該怎麼測試呢？
另外抽midi的時候也不是在無菌室抽的 照理說沒那麼容易污染 覺得很納悶..
或是還有其他可能也請不吝告知
謝謝 ><
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 42.73.209.15
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※ 編輯: nellnell (42.73.209.15), 06/17/2016 16:14:12
1F：→ e104582001: 所以你之前有其他細胞轉同一支vector進去過嗎? 06/17 17:42
2F：→ e104582001: 說不定是你帶的基因導致死 cell death 06/17 17:43
3F：→ e104582001: 通常 transfect 所需要的DNA量都不太會導致汙染 06/17 17:43
4F：→ Ianthegood: ctrl沒死所以不是reagent吧? 06/18 02:21
5F：→ nellnell: 回e大 但是連pcDNA跟GFP都死了 滿納悶的.. 06/18 07:11
6F：→ nellnell: 之前沒有做過 這是第一次做 06/18 07:12
7F：→ nellnell: 回lan大 我的control是什麼都沒加 連reagent都沒有QQ 06/18 07:13
8F：推 Bows: 什麼都不加不叫control,pcDNA or pGFP(看你載體用那個）才叫 06/18 14:17
9F：→ Bows: control 06/18 14:17
10F：→ osla30: 空載體都死，那就是reagent了吧？ 06/18 15:04
11F：→ xxtomnyxx: 把配製 transfection mixture 的 serum-free medium 換 06/18 15:07
12F：→ xxtomnyxx: 成新的 06/18 15:07
13F：推 darrenyo: 把DNA reagent 跟 serum free medium 丟到medium養看有 06/18 22:27
14F：→ darrenyo: 沒有汙染 06/18 22:27
15F：→ darrenyo: 分別 06/18 22:27
16F：推 b1l3hlkff: 你有去掉dna 的endotoxin嗎 07/27 09:30