作者anber2010 (anber)
看板Biotech
標題[求救] 關於石蠟切片與冷凍切片的比較問題
時間Sat Jun 4 08:45:42 2016
各位好，但因為工作的關係必須了解冷凍和石蠟切片的差異
其中關於切片厚度與機台操作的細節，始終無法理解也google不到
想請教各位實際使用過的人幫忙解惑
我是紮實的門外漢
如果問了太門外漢或是不專業的用語請小力鞭 > <
我想詢問的問題關於石蠟切片與冷凍切片的比較，我的理解是否正確？
*問題一：為什麼冷凍切片的建議厚度是10~30um，無法像石蠟切片的厚度一樣3~5um這麼薄
?
=>我的理解 (1) 冷凍後的組織較硬脆，
所以人員操作上不容易薄片又切的平整光滑
(2) 冷凍後的組織容易受到冰晶影響，
裁切時候如果太薄遇到室溫的瞬間薄片軟化，容易使得組織破掉
*問題二：生物組織體的切片的厚度要如何定義？
為什麼資料說細胞密集的薄切，纖維多細胞稀的可厚切？
*問題三：冷凍切片時，將冷凍包埋的組織體放在機台上時，
加入一種液體讓組織體固定在低溫的平台上
（看起來像快乾這樣膠狀體），請問這是什麼液體？
=>我的理解 是ＯＣＴ冷凍包埋組織，
同時ＯＣＴ也是用來固定平台，可在低溫中快速結凍
（參考影片
https://www.youtube.com/watch?v=3l00yk51Pps ）
*問題四：切片機有直立切和橫切兩種。
直立式的切片機跟上圖橫切的切片機功能有差別嗎？
厚度？或是組織體？或是冷凍或石蠟用的應用差別？
再麻煩各位了！感謝
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1F：→ anber2010: 第一次手機排版，發現出現好多？？，不知道怎麼修改， 06/04 08:48
2F：→ anber2010: 格式也怪怪的…閱讀不便請見諒。 06/04 08:48
3F：推 goodday06: 蠟切的樣品已經通常已經福馬林浸泡、石蠟包埋 06/04 10:27
4F：→ goodday06: 可切較薄 可是冰凍切僅OCT包埋 樣品較軟弱 無法切太薄 06/04 10:29
5F：→ goodday06: 切厚薄視技術及需求 達到目的、結果清楚 不一定要超薄 06/04 10:32
6F：推 tz2733: 1跟組織切片前的處理有關 冰晶是細胞內水份造成 有些實驗 06/04 12:45
7F：→ tz2733: 冷切前組織有先處理置換細胞內水份 就也是可以切薄一些 06/04 12:45
8F：→ tz2733: 但蠟切的前處理更多步驟 可切更薄 你可以查一下蠟切前處 06/04 12:45
9F：→ tz2733: 理的資料 2可從切片後是要看細胞的樣子排列等角度去思考 06/04 12:46
10F：→ tz2733: 問題 但有時切片多厚跟是什麼組織比較有關 一些比較難切 06/04 12:46
11F：→ tz2733: 的組織要切薄也太考驗技術了...3對 是OCT 摸起來像膠水... 06/04 12:46
12F：→ tz2733: .低溫變白凝固 4都用過但不太清楚差別 平切那種似乎無法 06/04 12:46
13F：→ tz2733: 像垂直切的機器可以切連成一長條的... 06/04 12:46
14F：推 tz2733: 補充 我是指蠟切直切可以連成一長條...冷切還沒看過 06/04 12:50
15F：推 michealking: 你要切之前也要找人帶你切 直接問帶的人吧 06/06 15:30
16F：→ goodday06: 還沒找人帶 早一步做些功課也不錯啦 06/06 19:14
17F：→ goodday06: 有些地方是得到處求神拜佛 憑空構築出流程 06/06 19:15
18F：→ goodday06: 做些功課再拜託人帶 比較有學習的誠意 06/06 19:15
19F：→ ghjkl5566: 你兩種都做過後就會知道 福馬林固定後的檢體很堅固 06/07 09:20
20F：→ ghjkl5566: 所以切薄沒什麼問題 而細胞多的要切薄是因為厚檢體 06/07 09:21
21F：→ ghjkl5566: 細胞堆疊太多層會很難看 而結締組織這種很透的基本上 06/07 09:22
22F：→ ghjkl5566: 不影響觀察 所以可以切厚 順便讓稀薄的細胞多一些 06/07 09:22
23F：→ ghjkl5566: 比較好觀察 而其他的問題基本上你問帶你的人就可以了 06/07 09:23