作者anber2010 (anber)
看板Biotech
标题[求救] 关於石蜡切片与冷冻切片的比较问题
时间Sat Jun 4 08:45:42 2016
各位好，但因为工作的关系必须了解冷冻和石蜡切片的差异
其中关於切片厚度与机台操作的细节，始终无法理解也google不到
想请教各位实际使用过的人帮忙解惑
我是紮实的门外汉
如果问了太门外汉或是不专业的用语请小力鞭 > <
我想询问的问题关於石蜡切片与冷冻切片的比较，我的理解是否正确？
*问题一：为什麽冷冻切片的建议厚度是10~30um，无法像石蜡切片的厚度一样3~5um这麽薄
?
=>我的理解 (1) 冷冻後的组织较硬脆，
所以人员操作上不容易薄片又切的平整光滑
(2) 冷冻後的组织容易受到冰晶影响，
裁切时候如果太薄遇到室温的瞬间薄片软化，容易使得组织破掉
*问题二：生物组织体的切片的厚度要如何定义？
为什麽资料说细胞密集的薄切，纤维多细胞稀的可厚切？
*问题三：冷冻切片时，将冷冻包埋的组织体放在机台上时，
加入一种液体让组织体固定在低温的平台上
（看起来像快乾这样胶状体），请问这是什麽液体？
=>我的理解 是ＯＣＴ冷冻包埋组织，
同时ＯＣＴ也是用来固定平台，可在低温中快速结冻
（参考影片
https://www.youtube.com/watch?v=3l00yk51Pps ）
*问题四：切片机有直立切和横切两种。
直立式的切片机跟上图横切的切片机功能有差别吗？
厚度？或是组织体？或是冷冻或石蜡用的应用差别？
再麻烦各位了！感谢
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1F：→ anber2010: 第一次手机排版，发现出现好多？？，不知道怎麽修改， 06/04 08:48
2F：→ anber2010: 格式也怪怪的…阅读不便请见谅。 06/04 08:48
3F：推 goodday06: 蜡切的样品已经通常已经福马林浸泡、石蜡包埋 06/04 10:27
4F：→ goodday06: 可切较薄 可是冰冻切仅OCT包埋 样品较软弱 无法切太薄 06/04 10:29
5F：→ goodday06: 切厚薄视技术及需求 达到目的、结果清楚 不一定要超薄 06/04 10:32
6F：推 tz2733: 1跟组织切片前的处理有关 冰晶是细胞内水份造成 有些实验 06/04 12:45
7F：→ tz2733: 冷切前组织有先处理置换细胞内水份 就也是可以切薄一些 06/04 12:45
8F：→ tz2733: 但蜡切的前处理更多步骤 可切更薄 你可以查一下蜡切前处 06/04 12:45
9F：→ tz2733: 理的资料 2可从切片後是要看细胞的样子排列等角度去思考 06/04 12:46
10F：→ tz2733: 问题 但有时切片多厚跟是什麽组织比较有关 一些比较难切 06/04 12:46
11F：→ tz2733: 的组织要切薄也太考验技术了...3对 是OCT 摸起来像胶水... 06/04 12:46
12F：→ tz2733: .低温变白凝固 4都用过但不太清楚差别 平切那种似乎无法 06/04 12:46
13F：→ tz2733: 像垂直切的机器可以切连成一长条的... 06/04 12:46
14F：推 tz2733: 补充 我是指蜡切直切可以连成一长条...冷切还没看过 06/04 12:50
15F：推 michealking: 你要切之前也要找人带你切 直接问带的人吧 06/06 15:30
16F：→ goodday06: 还没找人带 早一步做些功课也不错啦 06/06 19:14
17F：→ goodday06: 有些地方是得到处求神拜佛 凭空构筑出流程 06/06 19:15
18F：→ goodday06: 做些功课再拜托人带 比较有学习的诚意 06/06 19:15
19F：→ ghjkl5566: 你两种都做过後就会知道 福马林固定後的检体很坚固 06/07 09:20
20F：→ ghjkl5566: 所以切薄没什麽问题 而细胞多的要切薄是因为厚检体 06/07 09:21
21F：→ ghjkl5566: 细胞堆叠太多层会很难看 而结缔组织这种很透的基本上 06/07 09:22
22F：→ ghjkl5566: 不影响观察 所以可以切厚 顺便让稀薄的细胞多一些 06/07 09:22
23F：→ ghjkl5566: 比较好观察 而其他的问题基本上你问带你的人就可以了 06/07 09:23