作者Hsi06 (Hsi06)
看板Biotech
標題[求救] Wound healing assay Cell cycle的問題
時間Wed Mar 16 11:11:20 2016
最近在repeat過去學長做過的wound healing assay(用culture insert)
是比較低惡性細胞跟高惡性細胞的migration速度
學長做的wound healing assay只擷取了0 24 33hr的data
但就照片看來,感覺就是細胞數變多把細胞推出來的樣子
而我現在的問題是,
我重複這個實驗,發現17小時真的一點點migration的跡象都沒有
已經做了三次都是這樣
一直到大約18hr細胞才開始有一點點往中間wound的位置跑
24小時開始更明顯 33小時簡直是炸出來了
我的問題是,
「這個實驗準確性究竟如何呢?」「有沒有什麼condition是我需要注意的?」
到底是因為cell cycle而把細胞推出來的,還是細胞真的migration了?
我一般培養這個細胞也是大約24hr分裂一次
我使用的culture insert是ibidi,每個well各種6*104
細胞跟細胞之間沒有很緊密,大約是八分滿的細胞量
沒有用其他方法處理細胞(低血清培養 or gene轉殖)
實驗菜鳥,還請各位多多指教
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1F：→ milkpa: 同樣ibidi，3x10^4就滿了，可以先做MTT看對生長的影響 03/16 11:17
2F：推 abcam: ibidi的 有什麼特別之處嗎？我們是用其他牌子 03/16 20:50
3F：→ Hsi06: Culture insert應該都差不多,據學長說當初是挑便宜的買 03/18 00:21
4F：→ Hsi06: 謝謝milk的分享,cell量我有嘗試過了,我們細胞6*10^4最剛好 03/18 00:22