作者Hsi06 (Hsi06)
看板Biotech
标题[求救] Wound healing assay Cell cycle的问题
时间Wed Mar 16 11:11:20 2016
最近在repeat过去学长做过的wound healing assay(用culture insert)
是比较低恶性细胞跟高恶性细胞的migration速度
学长做的wound healing assay只撷取了0 24 33hr的data
但就照片看来,感觉就是细胞数变多把细胞推出来的样子
而我现在的问题是,
我重复这个实验,发现17小时真的一点点migration的迹象都没有
已经做了三次都是这样
一直到大约18hr细胞才开始有一点点往中间wound的位置跑
24小时开始更明显 33小时简直是炸出来了
我的问题是,
「这个实验准确性究竟如何呢?」「有没有什麽condition是我需要注意的?」
到底是因为cell cycle而把细胞推出来的,还是细胞真的migration了?
我一般培养这个细胞也是大约24hr分裂一次
我使用的culture insert是ibidi,每个well各种6*104
细胞跟细胞之间没有很紧密,大约是八分满的细胞量
没有用其他方法处理细胞(低血清培养 or gene转殖)
实验菜鸟,还请各位多多指教
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1F：→ milkpa: 同样ibidi，3x10^4就满了，可以先做MTT看对生长的影响 03/16 11:17
2F：推 abcam: ibidi的 有什麽特别之处吗？我们是用其他牌子 03/16 20:50
3F：→ Hsi06: Culture insert应该都差不多,据学长说当初是挑便宜的买 03/18 00:21
4F：→ Hsi06: 谢谢milk的分享,cell量我有尝试过了,我们细胞6*10^4最刚好 03/18 00:22