作者w175n57 ()
看板Biotech
標題MSC繼代不貼盤
時間Wed Mar 9 16:21:04 2016
人類骨髓MSC
以alpha-men +16.6%FBS+1%三合一抗生素培養
繼代時用0.5ml trypsin/10cm dish作用3min
以auto-pipette沖下收集並離心
數完細胞回種 隔天發現細胞都不貼盤
請問可能出了什麼問題??
謝謝大家
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1F：推 dkal6: 索性改3D Culture吧(大誤~ 03/09 16:22
2F：推 goodday06: 第一代有長到快八分滿嗎? MSC 很好貼 不貼可能死了... 03/09 16:50
3F：→ goodday06: 分盤時的密度? 分盤比例? 03/09 16:51
4F：→ w175n57: 有到8分滿才分盤 03/09 17:01
5F：→ w175n57: 通常是1分10 03/09 17:01
6F：→ w175n57: 打下來要種到6 well做實驗的也不貼 03/09 17:02
7F：→ goodday06: 一分10太稀 而且如果你門沒有特製配方 MSC 不好養 03/09 17:05
8F：→ goodday06: 甚至1分2 1分3 還得長很久 03/09 17:06
9F：→ goodday06: MSC 配方很多種 養起來生長速度也差很多 03/09 17:13
10F：→ lail: 1分10太稀… 03/09 20:25
11F：→ w175n57: 為了避免MSC老化 而用低密度培養 03/10 14:55
12F：→ w175n57: seeding的細胞有一定數量 也不會太稀 03/10 14:57
13F：→ goodday06: 你們lab有成功培養過嗎? lab過去的人也這樣養嗎? 03/10 15:55
14F：→ goodday06: hBM-MSC 直覺上還真是不易取得的材料 03/10 15:56
15F：→ goodday06: 數一數再種很謹慎不錯 可1分10大多人會覺得太稀 03/10 15:58
16F：→ goodday06: 長很快的細胞才會這樣分 03/10 15:59
17F：→ w175n57: 之前1分20也有成功 最低有種到10000/10cm dish 03/15 16:41
18F：推 joseph103331: 以前看別人養大約4000~5000cells/cm2會比較好 03/26 17:07
19F：→ joseph103331: 不過今天的原因是不貼, 是否trypsin作用太久了呢? 03/26 17:08