作者w175n57 ()
看板Biotech
标题MSC继代不贴盘
时间Wed Mar 9 16:21:04 2016
人类骨髓MSC
以alpha-men +16.6%FBS+1%三合一抗生素培养
继代时用0.5ml trypsin/10cm dish作用3min
以auto-pipette冲下收集并离心
数完细胞回种 隔天发现细胞都不贴盘
请问可能出了什麽问题??
谢谢大家
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1F：推 dkal6: 索性改3D Culture吧(大误~ 03/09 16:22
2F：推 goodday06: 第一代有长到快八分满吗? MSC 很好贴 不贴可能死了... 03/09 16:50
3F：→ goodday06: 分盘时的密度? 分盘比例? 03/09 16:51
4F：→ w175n57: 有到8分满才分盘 03/09 17:01
5F：→ w175n57: 通常是1分10 03/09 17:01
6F：→ w175n57: 打下来要种到6 well做实验的也不贴 03/09 17:02
7F：→ goodday06: 一分10太稀 而且如果你门没有特制配方 MSC 不好养 03/09 17:05
8F：→ goodday06: 甚至1分2 1分3 还得长很久 03/09 17:06
9F：→ goodday06: MSC 配方很多种 养起来生长速度也差很多 03/09 17:13
10F：→ lail: 1分10太稀… 03/09 20:25
11F：→ w175n57: 为了避免MSC老化 而用低密度培养 03/10 14:55
12F：→ w175n57: seeding的细胞有一定数量 也不会太稀 03/10 14:57
13F：→ goodday06: 你们lab有成功培养过吗? lab过去的人也这样养吗? 03/10 15:55
14F：→ goodday06: hBM-MSC 直觉上还真是不易取得的材料 03/10 15:56
15F：→ goodday06: 数一数再种很谨慎不错 可1分10大多人会觉得太稀 03/10 15:58
16F：→ goodday06: 长很快的细胞才会这样分 03/10 15:59
17F：→ w175n57: 之前1分20也有成功 最低有种到10000/10cm dish 03/15 16:41
18F：推 joseph103331: 以前看别人养大约4000~5000cells/cm2会比较好 03/26 17:07
19F：→ joseph103331: 不过今天的原因是不贴, 是否trypsin作用太久了呢? 03/26 17:08