作者shinney (努力向前)
看板Biotech
標題[求救] 想請問有人有養過DC 2.4 cell嗎
時間Mon Mar 7 17:53:02 2016
發問時請注意，若是要問實驗相關的問題，請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
若是求救事項涉及實驗室智慧財產(例如細胞細菌植株、質體載體等）之分讓，
請務必註明貴實驗室願意設立 正式合作或 簽署材料分讓協議(MTA)，否則版工將逕行刪除
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恩 最近回實驗室作實驗
第一次養DC 2.4 cell line
但是沒有看到這株細胞的相關培養詳細內容
我指的是 型態 培養詳細方法
(我知到培養液等等內容 paper上的
沒有在ATCC上看到這株細胞 也許是我的keyword不對)
目前解凍 換過一次培養液
把它用另一種樹突細胞來養
覺得這個細胞是懸浮型 因為不太貼
圓圓聚集
我是以懸浮細胞的方式來養
吸培養液=> PBS wash dish ==> 離心 1000rpm 5min
==>倒掉上清液==>稀釋養入10cm dish
如何看這類細胞長滿
沒有任何cytokines treat的狀態下
應該看不到樹突的延伸 就圓圓 飄阿飄
希望大家可以分享賜教一下 覺得它有點weak
感謝大家
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1F：→ lesswind: medium是用哪一種?配方可以貼上來看一下嗎? 03/09 14:37
2F：→ lesswind: 這種細胞是貼附型的 03/09 14:38
3F：→ lesswind: 細胞型態應該為紡錘型~有處理才會伸出樹突 03/09 14:38
4F：→ shinney: 學姐叫我自己查 但我沒找到觀察了一兩天 都不會貼 03/10 00:52
5F：→ shinney: the murine DC line,DC 2.4 adhere to the C57BL/6 bone 03/10 00:53
6F：→ shinney: medium RPMI 1640 with100U/ml(P/S) 2mM glutamine10%FBS 03/10 00:57
7F：→ shinney: 恩 我覺得應該是懸浮型的 因為解凍後放三~四天細胞不太貼 03/10 01:00
8F：→ shinney: 但還是沒死 我是用別人養DC cell line的方式養但不同細胞 03/10 01:01
9F：→ shinney: 我找了很多但找不到這細胞的相關型態只好求救 03/10 01:04
10F：推 lesswind: 我之前碩班有養過DC2.4好像medium還有加其他東西2-ME跟N 03/10 09:16
11F：→ lesswind: NEAA 丙酮酸 然後絕對不是懸浮~會飄就是死掉了~ 03/10 09:17
12F：→ lesswind: 然後之後都是做primary culture去取骨髓讓單核球分化成 03/10 09:18
13F：→ lesswind: 樹突細胞~ 03/10 09:18
14F：→ shinney: 恩 透過同學找到一個碩班學生的論文 他說是半懸浮型的 03/10 23:12
15F：→ shinney: 不過 今天先分成兩盤 比之前的貼附情況好點 明天再觀察 03/10 23:13
16F：推 jabari: 照理講.. dc應該很會貼 給他一點時間? 03/11 18:03
17F：→ shinney: 恩會貼但沒有紡錘狀 就圓的 邊邊有小觸手爪盤子 03/11 23:51
18F：→ shinney: 恩 就跟老師之前發的paper上的DC一樣 03/11 23:51
19F：→ shinney: 大家會去算細胞的doubling time嗎 今天學姐問我這 03/11 23:52
20F：→ shinney: 我以前碩班不會去算這個 哈哈 03/11 23:53
21F：→ shinney: 如果要算這個是要幾個時間點最理想呢 目前是想24 48 72 h 03/11 23:54
22F：推 jabari: 剛入手的細胞會去算 因為這樣週末才不用加班 XD 03/12 00:14
23F：推 antibiotic: 我們實驗室有特別用liquid medium去養 03/14 12:36