作者shinney (努力向前)
看板Biotech
标题[求救] 想请问有人有养过DC 2.4 cell吗
时间Mon Mar 7 17:53:02 2016
发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
若是求救事项涉及实验室智慧财产(例如细胞细菌植株、质体载体等）之分让，
请务必注明贵实验室愿意设立 正式合作或 签署材料分让协议(MTA)，否则版工将迳行删除
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恩 最近回实验室作实验
第一次养DC 2.4 cell line
但是没有看到这株细胞的相关培养详细内容
我指的是 型态 培养详细方法
(我知到培养液等等内容 paper上的
没有在ATCC上看到这株细胞 也许是我的keyword不对)
目前解冻 换过一次培养液
把它用另一种树突细胞来养
觉得这个细胞是悬浮型 因为不太贴
圆圆聚集
我是以悬浮细胞的方式来养
吸培养液=> PBS wash dish ==> 离心 1000rpm 5min
==>倒掉上清液==>稀释养入10cm dish
如何看这类细胞长满
没有任何cytokines treat的状态下
应该看不到树突的延伸 就圆圆 飘阿飘
希望大家可以分享赐教一下 觉得它有点weak
感谢大家
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1F：→ lesswind: medium是用哪一种?配方可以贴上来看一下吗? 03/09 14:37
2F：→ lesswind: 这种细胞是贴附型的 03/09 14:38
3F：→ lesswind: 细胞型态应该为纺锤型~有处理才会伸出树突 03/09 14:38
4F：→ shinney: 学姐叫我自己查 但我没找到观察了一两天 都不会贴 03/10 00:52
5F：→ shinney: the murine DC line,DC 2.4 adhere to the C57BL/6 bone 03/10 00:53
6F：→ shinney: medium RPMI 1640 with100U/ml(P/S) 2mM glutamine10%FBS 03/10 00:57
7F：→ shinney: 恩 我觉得应该是悬浮型的 因为解冻後放三~四天细胞不太贴 03/10 01:00
8F：→ shinney: 但还是没死 我是用别人养DC cell line的方式养但不同细胞 03/10 01:01
9F：→ shinney: 我找了很多但找不到这细胞的相关型态只好求救 03/10 01:04
10F：推 lesswind: 我之前硕班有养过DC2.4好像medium还有加其他东西2-ME跟N 03/10 09:16
11F：→ lesswind: NEAA 丙酮酸 然後绝对不是悬浮~会飘就是死掉了~ 03/10 09:17
12F：→ lesswind: 然後之後都是做primary culture去取骨髓让单核球分化成 03/10 09:18
13F：→ lesswind: 树突细胞~ 03/10 09:18
14F：→ shinney: 恩 透过同学找到一个硕班学生的论文 他说是半悬浮型的 03/10 23:12
15F：→ shinney: 不过 今天先分成两盘 比之前的贴附情况好点 明天再观察 03/10 23:13
16F：推 jabari: 照理讲.. dc应该很会贴 给他一点时间? 03/11 18:03
17F：→ shinney: 恩会贴但没有纺锤状 就圆的 边边有小触手爪盘子 03/11 23:51
18F：→ shinney: 恩 就跟老师之前发的paper上的DC一样 03/11 23:51
19F：→ shinney: 大家会去算细胞的doubling time吗 今天学姐问我这 03/11 23:52
20F：→ shinney: 我以前硕班不会去算这个 哈哈 03/11 23:53
21F：→ shinney: 如果要算这个是要几个时间点最理想呢 目前是想24 48 72 h 03/11 23:54
22F：推 jabari: 刚入手的细胞会去算 因为这样周末才不用加班 XD 03/12 00:14
23F：推 antibiotic: 我们实验室有特别用liquid medium去养 03/14 12:36