作者PanasonicCM1 (Panasonic CM1)
看板Biotech
標題[討論] 如何確保細胞在每個well一樣多
時間Fri Nov 27 11:26:54 2015
如何讓細胞每個well都一樣多
就是一個50cc tube裡
有15cc細胞液
我要把他平均分配到24well
每well 500ul
我發現到最後都無法確保每個well的細胞一樣多
請問各位都怎麼做的
謝謝
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1F:推 leptoneta: 確認混勻後迅速加到well 會有這問題表示你沒混勻或太慢 11/27 11:39
2F:→ raiyu: 你要不要先說一下你是怎麼做的 大家才有辦法幫你抓錯 11/27 11:43
3F:→ PanasonicCM1: 用autopipet上下10次後 用p1000取500ul來回一直加 11/27 11:48
4F:推 bpjp: 混合的手法跟速度 11/27 12:50
5F:→ PanasonicCM1: 可以講詳細點嗎 11/27 13:36
6F:推 tsubasawolfy: 我比較好奇你怎麼確定每個Well的數量XD 11/27 14:21
7F:→ PanasonicCM1: 因為有用mts看存活率 11/27 14:46
8F:→ untilnow: 這不是常PO_文又自刪的帳號嗎 11/27 15:49
10F:推 jabari: 還不簡單 作實驗前全部消化下來算啊 QwQ 11/27 17:59
11F:→ blence: 先前有建議,既然實驗室只有你一個,又只是個學士助理 11/28 08:23
12F:→ blence: 如果真心想學實驗換個lab比較快,瞎耗時間並不值得 11/28 08:26
13F:推 iceking: mts誤差本來就很大,用統計分析各well沒有差異就好了。 11/28 13:31
14F:→ lail: 其實再怎麼混勻,我覺得不可能連一顆細胞都不多不少… 11/28 15:13
15F:推 tsubasawolfy: 可以用flow sorting保證每孔都一樣XD。不過 mts測 11/29 00:55
16F:→ tsubasawolfy: 的是粒線體活性,跟細胞的絕對數量只是有相關但不是 11/29 00:55
17F:→ tsubasawolfy: 絕對數值。你要要求每孔的數字都一樣的話就算用sort 11/29 00:55
18F:→ tsubasawolfy: ing也不會完全一樣的吸光值。所以才需要做三重複以 11/29 00:55
19F:→ tsubasawolfy: 上求平均值。 11/29 00:55
20F:推 tynse71864: 不是很建議用 p1000 ,你 well 那麼多 加到最後細胞都 12/01 08:33
21F:→ tynse71864: 沉澱了 當然不準;建議用5 ml autopipet (因為你是吸0 12/01 08:33
22F:→ tynse71864: .5ml ,10ml tube相對又會加不準 12/01 08:33
23F:推 tynse71864: 做法:混勻 --加--蓋上蓋子 輕輕上下搖動再次混勻--加- 12/01 08:38
24F:→ tynse71864: - 12/01 08:38
25F:→ tynse71864: 不敢保證會完全一樣 但我之前做生長曲線誤差蠻小的 12/01 08:38