作者PanasonicCM1 (Panasonic CM1)
看板Biotech
标题[讨论] 如何确保细胞在每个well一样多
时间Fri Nov 27 11:26:54 2015
如何让细胞每个well都一样多
就是一个50cc tube里
有15cc细胞液
我要把他平均分配到24well
每well 500ul
我发现到最後都无法确保每个well的细胞一样多
请问各位都怎麽做的
谢谢
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1F：推 leptoneta: 确认混匀後迅速加到well 会有这问题表示你没混匀或太慢 11/27 11:39
2F：→ raiyu: 你要不要先说一下你是怎麽做的 大家才有办法帮你抓错 11/27 11:43
3F：→ PanasonicCM1: 用autopipet上下10次後 用p1000取500ul来回一直加 11/27 11:48
4F：推 bpjp: 混合的手法跟速度 11/27 12:50
5F：→ PanasonicCM1: 可以讲详细点吗 11/27 13:36
6F：推 tsubasawolfy: 我比较好奇你怎麽确定每个Well的数量XD 11/27 14:21
7F：→ PanasonicCM1: 因为有用mts看存活率 11/27 14:46
8F：→ untilnow: 这不是常PO_文又自删的帐号吗 11/27 15:49
10F：推 jabari: 还不简单 作实验前全部消化下来算啊 QwQ 11/27 17:59
11F：→ blence: 先前有建议,既然实验室只有你一个,又只是个学士助理 11/28 08:23
12F：→ blence: 如果真心想学实验换个lab比较快,瞎耗时间并不值得 11/28 08:26
13F：推 iceking: mts误差本来就很大，用统计分析各well没有差异就好了。 11/28 13:31
14F：→ lail: 其实再怎麽混匀，我觉得不可能连一颗细胞都不多不少… 11/28 15:13
15F：推 tsubasawolfy: 可以用flow sorting保证每孔都一样XD。不过 mts测 11/29 00:55
16F：→ tsubasawolfy: 的是粒线体活性，跟细胞的绝对数量只是有相关但不是 11/29 00:55
17F：→ tsubasawolfy: 绝对数值。你要要求每孔的数字都一样的话就算用sort 11/29 00:55
18F：→ tsubasawolfy: ing也不会完全一样的吸光值。所以才需要做三重复以 11/29 00:55
19F：→ tsubasawolfy: 上求平均值。 11/29 00:55
20F：推 tynse71864: 不是很建议用 p1000 ,你 well 那麽多 加到最後细胞都 12/01 08:33
21F：→ tynse71864: 沉淀了 当然不准；建议用5 ml autopipet (因为你是吸0 12/01 08:33
22F：→ tynse71864: .5ml ,10ml tube相对又会加不准 12/01 08:33
23F：推 tynse71864: 做法:混匀 --加--盖上盖子 轻轻上下摇动再次混匀--加- 12/01 08:38
24F：→ tynse71864: - 12/01 08:38
25F：→ tynse71864: 不敢保证会完全一样 但我之前做生长曲线误差蛮小的 12/01 08:38