作者dorisaq2791 (dorisaq2791)
看板Biotech
標題[求救] Q-PCR primer秀逗?
時間Sat Jul 11 19:59:25 2015
實驗室跑qpcr是使用step one這台機器
原本都跑得很順，有一次突然發現某個基因(代稱A-1)跑了兩次都是undetected
用別人的primer就跑得出來了。
ps:我們訂的primer是已經煮好的，常溫配送到實驗室，稀釋就可直接用了。
看個人習慣保存於4度或著-20度 ，這一陣子太常跑qpcr，我都放4度(我知道
長期來看不好，不過這裡我只是想強調我用的幾組primer保存條件都一樣)
疑點如下:
1.別人的primer也是從同一管stock分裝出來的
2.即使從原管重新再分裝一次還是跑不出來
3.那天跑的幾個基因，保存條件完全一樣，但只有這個有問題
4.那管stock就這麼壞了，不過先前分裝給別人的都沒有事
那一次是重訂新的primer解決的，原本以為是偶發事件，直到第二次發生。
不同的地方如下：
1.基因不同(不過互相是次單元體關係，代稱為A-2)
2.第一次分裝曾重覆使用eppendorf(所以上次以為可能是汙染之類導致)，
可是這次這個primer只分出這一管，原管stock就只開過第一次分裝，
因為出問題，才再打開這個stock，分裝出來還是gg(這次都用新的eppendorf)。
想問是不是單純保存問題還是我有其他沒想到的地方?因為A-1我有兩個序列是同時訂來
測試的，也都放4度，可是他沒壞，而且壞掉這兩個primer都不是反覆離開冰箱最多次的。
這次很果斷的一發現就先訂新的primer(果然立馬解決)，但是還是想知道原因。
拜託各位大大了!! 萬分感謝。
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1F：→ lail: 下次訂粉狀的primer回來自己回溶，溶完stoke冰-20℃冰箱如 07/11 21:07
2F：→ lail: 何？我的 primer這樣保存目前還沒遇到問題過 07/11 21:07
3F：推 bluesnow1122: 第二次應該可以反應給廠商, 問他們如何處理 07/11 22:25
4F：推 ararthur: 的確會出現stock忽然也壞掉的狀況 我遇過 就乖乖重訂吧 07/23 16:11
5F：推 windyflyer: 這樣方法拿到的primer的確有機率會怪怪的 07/30 22:45
6F：→ windyflyer: 我們家之前也用過一陣子 但實在不穩定所以後來還是換 07/30 22:45
7F：→ windyflyer: 訂來是粉狀的 07/30 22:45