作者dorisaq2791 (dorisaq2791)
看板Biotech
标题[求救] Q-PCR primer秀逗?
时间Sat Jul 11 19:59:25 2015
实验室跑qpcr是使用step one这台机器
原本都跑得很顺，有一次突然发现某个基因(代称A-1)跑了两次都是undetected
用别人的primer就跑得出来了。
ps:我们订的primer是已经煮好的，常温配送到实验室，稀释就可直接用了。
看个人习惯保存於4度或着-20度 ，这一阵子太常跑qpcr，我都放4度(我知道
长期来看不好，不过这里我只是想强调我用的几组primer保存条件都一样)
疑点如下:
1.别人的primer也是从同一管stock分装出来的
2.即使从原管重新再分装一次还是跑不出来
3.那天跑的几个基因，保存条件完全一样，但只有这个有问题
4.那管stock就这麽坏了，不过先前分装给别人的都没有事
那一次是重订新的primer解决的，原本以为是偶发事件，直到第二次发生。
不同的地方如下：
1.基因不同(不过互相是次单元体关系，代称为A-2)
2.第一次分装曾重覆使用eppendorf(所以上次以为可能是污染之类导致)，
可是这次这个primer只分出这一管，原管stock就只开过第一次分装，
因为出问题，才再打开这个stock，分装出来还是gg(这次都用新的eppendorf)。
想问是不是单纯保存问题还是我有其他没想到的地方?因为A-1我有两个序列是同时订来
测试的，也都放4度，可是他没坏，而且坏掉这两个primer都不是反覆离开冰箱最多次的。
这次很果断的一发现就先订新的primer(果然立马解决)，但是还是想知道原因。
拜托各位大大了!! 万分感谢。
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1F：→ lail: 下次订粉状的primer回来自己回溶，溶完stoke冰-20℃冰箱如 07/11 21:07
2F：→ lail: 何？我的 primer这样保存目前还没遇到问题过 07/11 21:07
3F：推 bluesnow1122: 第二次应该可以反应给厂商, 问他们如何处理 07/11 22:25
4F：推 ararthur: 的确会出现stock忽然也坏掉的状况 我遇过 就乖乖重订吧 07/23 16:11
5F：推 windyflyer: 这样方法拿到的primer的确有机率会怪怪的 07/30 22:45
6F：→ windyflyer: 我们家之前也用过一阵子 但实在不稳定所以後来还是换 07/30 22:45
7F：→ windyflyer: 订来是粉状的 07/30 22:45