※ 引述《derren (我想要ㄉ幸福M)》之銘言： : 求救各位大大 : 實驗室用肺組織石蠟切片染色 : 一開始使用DAB染色以為有染上， : 但因型態實心是很奇怪(長得有點像圓盤狀紅血球) : http://imgur.com/0PDO7oP : 我們想要染肺細胞的水通道蛋白， : 理論上應該在細胞膜上並空心圍繞著核， : 所以後來又使用了螢光染色， : 發現有很多黃色雜質，而且都沒有跟DAPI merge在一起 : http://imgur.com/IF2i3oT : 在高倍下螢光強度加強才看到有綠色螢光細胞 : http://imgur.com/7RM7YOA : http://imgur.com/4iaTQsK : 想請問各位如何減少雜質， : 目前我所推測到的是我們未使用灌流所以雜質都是紅血球(無核)? : 不知道是否是這個原因造成的? : 謝謝各位大大 不知道您使用的peroxidase blocking用多少濃度的H2O2 且blocking多久 通常這和peroxidase blocking的步驟有關係 你可以嘗試稍微提高H2O2濃度 或是用原來的濃度blocking兩次 試試看 之前我們也有一些case會這樣 後來是以增加blocking次數來排除這個情況 這些是因為DAB和RBC裡面的peroxidase作用呈色的 如果組織內有血漿的話也會這樣 --

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