作者neverleave45 (ㄕㄠˊ)
看板Biotech
標題[求救] Western一抗震盪問題
時間Fri Jan 3 22:50:11 2014
大家好，不好意思，因為最近在做Western，因為要把一抗Reuse，
所以將一抗在4度中與membrane反應overnight，但由於實驗室的冰箱實在
沒辦法把shaker放進去，如果不震盪，這樣會影響抗體跟目標蛋白的結合嗎？
不知道有沒有板友也是直接放4度不震盪反應的。
謝謝大家！
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◆ From: 1.163.247.194
1F：→ puec2:理論上是不用震，但是如果你的液面沒有完全蓋過膜 01/03 23:54
2F：→ puec2:要注意染色不均勻的問題。我們以前遇過wash的時候假裝很小心 01/03 23:55
3F：→ puec2:故意把轉速調超低，結果押出來膜上就是一個圈圈 01/03 23:55
4F：→ blence:理論上不用4度,我幾乎所有的reuse一抗都一樣RT,包含phospho 01/04 00:19
5F：→ neverleave45:感謝各位解答!! 01/04 00:26
6F：→ puec2:牛奶放overnight RT不會壞掉嗎？ 01/04 00:36
7F：→ blence:說到RT當然是1~2h阿,就像說到4度就會聯想到至少是0/N一樣 01/04 00:43
8F：→ saviora:一抗室溫通常是快攻走法 01/04 02:10
9F：推 chaunen:覺得翹翹板那種最好用... 01/04 02:28
10F：推 longlongleg:不震盪的話會造成1抗沉澱，如意染到non-spesific band 01/05 19:23