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1.CYP1A2 accession number? gene? mRNA? 請上NCBI查詢 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene 2.CYP1A2*2 (63C>G)跟CYP1A2*1F (-164A>C) 用google就有了 *2是指exon2, 另一個則是ATG往前數,已經越來越少人用這樣的標示 現在都直接取rs number來表示SNP位置 像前者是rs56160784,後者是rs762551 也請直接上http://www.ncbi.nlm.nih.gov/snp/ 查詢相關資訊 3.你們使用的MboII應該可以看出廠牌 不清楚可以參考NEB這家公司的網頁說明 https://www.neb.com/products/r0148-mboii 4.如果你方便查rs56160784,可以知道兩側的序列是5'-CCATCTT(C/G)TGCCT-3' 這樣應該可以判斷若MboII有作用,C allele是不是符合你們看到的結果了 順帶一提,rs56160784的確沒有MAF資料,連1KGenome也沒有 而rs762551的MAF則有0.4左右 你們的樣本是有可能觀察到這個SNP存在 ※ 引述《tirecake (Allo le monde)》之銘言: : 各位科學家大家好 : 我們班上實驗課最近在測班上同學的CYP1A2是否有SNP "CYP1A2*2"(63C>G) : 做PCR夾出含有SNP片段之後 用MboII切 : 查到MboII切 5'GAAGANNNNNNNN 3' : ^ : 3'CTTCTNNNNNNN 5' : 想請問 : 1) 那些N是什麼意思 我以為限制酶要找對的序列切 要很精準? N不管是啥都會切囉? : 2) 我們要找的SNP是C>G, 但63是從哪裡算起,畢竟我們primer夾出201base pair : 如果有突變成G 會切成122+79 : 跑膠之後 發現大家都是G/G (homozygous突變!!) 各文獻顯示63C>G很罕見啊 : 怎會全班都突變哩 : 是不是我有誤解哪部分的資訊 : 我有想把primer序列打到NCBI去看夾出來的片段 但是我還是不知道63是從哪裡算起 : 這片段裡也有可能有很多C : 1-不確定human CYP1A2 accession number : 2-我貼了整段CYP1A2序列(NCBI跟Primer3) 但我們用的primer卻夾不到片段??? : (後來primer3夾到了...但是不知道怎麼使用來檢查班上的突變?) : 3-其實我們同時有夾另一段有SNP CYP1A2*1F (-164A>C) 負的位置是指promoter嗎 : 我是不是要去找exon intron structure有幫助呢? : 還要請大家幫我找我查資料的方式錯在哪 : 謝謝你們 ※ 編輯: blence 來自: 180.218.152.101 (11/09 03:56)
1F:推 tirecake:謝謝詳細的解釋 結果發現應該是多年來班上都誤判 11/09 15:38
2F:→ tirecake:每年都有實驗課做學生檢體 多年來都判成突變 11/09 15:39
3F:→ tirecake:不過在不知道rs#的時候 是要在NCBI SNP地毯式搜索嗎?y 11/09 15:40
4F:→ Bows:-164試紙ATG往前嗎?,一般不是以mRNA起點為+1? 11/09 18:26
5F:→ blence:回樓上,從哪裡往前是比對位置才知道,這個SNP很久了,當年不 11/09 20:33
6F:→ blence:見得知道原始TStart從哪開始,但ATG比較容易(這也是用rs好處 11/09 20:35
7F:→ blence:不知道rs可以用NCBI/SNP以gene找,有geneview列出SNP全清單 11/09 20:37







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